牛源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）价格,详情介绍-960化工网

牛源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

价格：￥1

品牌：YLKBIO

产地：国产

最新更新日期：2022-08-08 17:20

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优利科（上海）生命科学有限公司

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公司：优利科（上海）生命科学有限公司

联系人：王经理

产品属性

产品说明

牛源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

产品说明

物种鉴定系列可针对食品、饲料等样品中动物源性成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于牛源性成分的检测，检出限为 0.5%。

产品组成（48 测试）

试剂	含量
A-牛源-P	20μL × 8 管× 6 排
NG-P	100μL × 2 支
PG-牛源-P	100μL × 1 支

适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mix 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。

自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。

注意事项

1. 本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
  1. 第一区：样本制备区。
  2. 第二区：模板添加区。
  3. 第三区：扩增及产物分析区。

★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。

1. 实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
2. 严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
3. 反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒。
1. 反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
2. 不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。

样品处理

参照《肉制品中动物源性成分的测定实时荧光 PCR 法》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤，为防止交叉污染，应使用一次性消耗品，研钵应经 160℃干烤2 h，其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次氯钠溶液浸泡。
取样应尽量采取肌肉组织，对于同一批样品，应多点采集合并后，作为一份样品进行均质，提取 DNA。
采样过程应快速完成，将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状，充分混匀，取 0.1 g 充分混匀的样品，采用液氮研磨或均质器均质。
详细步骤请按照标准操作。

实验操作

模板制备（样本制备区）

建议使用动物组织基因组 DNA 提取试剂盒等商品化试剂盒，具体过程详见产品说明书。

添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）

剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-牛源-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀 30s，离心 1min，立即进行 PCR 扩增反应。

扩增反应（扩增及产物分析区）

使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 NONE。按下列条件设置扩增反应：

	PCR 循环			荧光收集位点
去污染	37℃	10 分钟	1 个循环	—
预变性	95℃	5 分钟	1 个循环	—
扩增	95℃	15 秒	40 个循环	—
扩增	60℃	60 秒	40 个循环	※

基线和阈值设定

基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过空白对照扩增曲线的最高点。

结果判定

检测样品 Ct＞35，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可报告样品阴性，不含有牛源性成分或含量低于检测限；
检测样品 Ct＜30，曲线呈“S”型扩增曲线，可直接报告样品阳性，含有牛源性成分；
检测样品 30≤Ct≤35，需进行一次重复实验，若 Ct 值>35 则为阴性，或无典型曲线，不含有牛源性成分或含量低于检测限；否则为阳性，含有牛源性成分。
★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。

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