Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)说明书价格,详情介绍-960化工网

Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)说明书

价格：¥800 - 3800

品牌：研生

产地：进口

最新更新日期：2021-06-04 13:35

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上海研生实业有限公司

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产品属性

数量

英文名	Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit

CAS号

详见说明书

保质期

详见说明书

供应商

上海研生

保存条件

低温冷藏

规格	10T\|20T\|50T\|100T

产品说明

实验报告：
一、Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)说明书分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)说明书
英文名称：Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit
产品规格：10T|20T|50T|100T
发货周期：1～3天
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。AnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将AnexinV进行荧光素kFluor594标记，以标记了的AnexinV作为荧光探针，利用荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
本试剂盒可用于悬浮细胞以及贴壁培养的细胞，不适用于组织。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
4--2-氟-5-硝溴代十六烷/十六烷基溴/溴代鲸蜡烷/鲸蜡基溴/1-溴代十六烷/1-溴十六烷/正十六烷基溴/1-溴正十六烷/1-Bromohexadecane
2,3-二酸酯1-溴代辛烷/1-溴代正/溴辛烷/1-溴辛烷/溴代辛烷/辛基溴/1-溴辛烷/正辛基溴/溴代烷/1-溴代辛烷/1-Bromooctane
2,3-二酰胺1-溴代庚烷/1-溴庚烷/正庚基溴/溴代庚烷/1-溴代正/溴庚烷/1-Bromoheptane
2,3-二酮十萘/萘/双环（4.4.0）癸烷/十化萘/全化萘/Decahydronaphthalene
3,5-二哒嗪三苯基烷/Triphenylmethane
(S)-1-[(酰基氨基)基]-2-基酸酯二苯基烷/双苯烷/二苯烷/1,1-亚基二苯/苄/人造香叶油/二苯基氧树脂/Diphenylmethane
4--6-基二安替比林烷/4,4′-亚基二安替比林/二安替吡啉烷/1,1’-二安替比林烷/4,4’-次基二安替比林烷/二(1-苯基-2，3-二基-5-吡唑酮)烷/DAPM/DAM
1-基-3-基咪唑化铝盐1,1,3,3-四氧基烷/二缩/二双(缩二醇)/1,1,3,3-Tetraethoxypropane
2-羟基-4-腈1,2,3-三溴烷/均三溴烷/1,2,3-Tribromopropane
2--3-溴-6-基吡啶2，2-二(4-羟)烷/双酚A/2,2-二(4-羟苯基)烷/二酚基烷/4,4-(1-基亚基)双酚/2,2-双(4-羟基)烷/4,4二羟基二苯烷/二苯酚基烷/2,2-双(4-羟苯基)烷/2,2-双酚基烷/BPA
Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)说明书Toosendanin苦楝素10毫克超，
TOOS sodium saltN-基-N-(2-羟基-3-基)间盐25克BR，
Toluidine bule兰100毫克BR，
Toluidine blue O兰O25毫克99.0%
Tobramycin妥布霉素1克BR，3000u/mg
TOA三辛1克5N
TMTDN,N’-四基二双羰100克BR，
TMP胸苷二100毫克植物细胞培养级，99%
TMP三基5克CP，
TMP磷酯25克试剂级，
TMG四基胍1克AR
TMEDA延胡索0.25毫升高，99%
TMEDA四替二10克超，99%
TMD-10溴化四铵500毫升99.8%
TMB-US(ultra sensitive) solution3,3,5,5-四基联-US1公斤BR，
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

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