PEI转染试剂

¥580
东岭生物
2021-06-04 13:37

江苏博美达生命科学有限公司

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江苏博美达生命科学有限公司
唐晴
18013159935 0512-62956294
sales006@bomeida.com
产品属性
规格1ml(干冰运输)
产品说明
产品介绍:
本产品为阳离子聚合物类型转染试剂,具有安全性高、细胞毒性小、操作简单、转染效率高等特点。

产品信息:
产品名称货号规格储存条件
PEI转染试剂GE-20001-11ml4oC

其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂和组分
培养基;
胎牛血清;

使用说明:
请详细阅读使用说明后再开始相关实验。
(下述步骤以6孔板为例)
1.提前一天进行细胞铺板,使转染时细胞密度达到80%左右;
  1. 转染前1-4小时去除原有培养基,每孔加入2.4ml新鲜完全培养基(37℃预热,抗生素和血清不影响转染效率);
  2. 根据下表体系,在不含血清和抗生素的培养基中配制A/B液,充分吹打混匀:
AB
DNA3μgPEIl
培养基127μl培养基127μl
  1. B液加入A液中,轻轻吹打混匀,室温静置30min
  2. 将混合液逐滴加入到细胞中,前后左右轻轻摇晃混匀,放入37℃培养箱培养;
  3. 转染后16-20h,去除原有培养基,每孔加入2-3ml新鲜完全培养基(37℃预热
  4. 若质粒可表达荧光蛋白,转染后24h可观察到荧光信号,大部分细胞在72h表达达到高峰。

常见问题及提示

·细胞传代及换液所用PBS和培养基需恢复常温或37℃预热。
·不同细胞转染时,DNA与PEI比例可在1:1至1:5之间优化,从而提高转染效率。
·转染后可不更换培养基,但若因细胞密度等原因导致转染后细胞状态变差,建议在转染后16h更换新鲜培养基。
·不同培养体积对应转染体系见下表:
培养器皿培养液(ml)DNA(μg)PEI(μl)稀释体积(μl)
96孔板0.10.20.610 x 10
48孔板0.30.51.540 x 40
24孔板0.51360 x 60
12孔板1.31.54.5100 x 100
6孔板2.439127 x 127
10cm7.252060726 x 726
15cm20561682000 x 2000


数据展示:




:所示细胞按照本说明书进行GFP质粒转染,质粒转染16小时后荧光显微镜下拍照记录转染效果