Pfu DNA聚合酶

概述

耐热性DNA聚合酶，分子量90KD，催化5'→3'DNA合成，DNA聚合时的保证延伸速度600bp/min，最佳温度65-75℃，dNTPs的工作浓度为100-300µM，最佳Mg²⁺浓度为2-3mM，最佳pH为8.1-9.1，其PCR产物为平整末端，无3'端的单个dA。Pfu DNA聚合酶具有独特的3'→5'外切核酸酶活性，能修正错配碱基，从而保证DNA扩增的高保真度。无5'→3'外切核酸酶活性。尤其适用于长度2kb DNA的高保真扩增，使用方法同Taq DNA聚合酶，DNA扩增（PCR）时，20µl反应体系需1-1.5unit，50µl反应体系需2-3units。

包装及组成

500单位

1. Pfu DNA聚合酶（5U/µl） 100µl

2. 10×Pfu缓冲液 1.5ml

3. PCR染料 1.5ml

Pfu DNA聚合酶储存液：50mM Tris-HCl(pH8.2)；0.1mM EDTA；0.1% Tween 20；0.1% NP-40；1mM DTT；50% glycerol缓冲液。-20℃保存一年以上，避免反复冻融。

10×Pfu反应缓冲液：KCl 100mM，(NH4)2SO4 160mM，MgSO4 20mM，Tris-HCl 200mM（pH8.8），TritonX-100 1%，BSA (fraction V) 1mg/ml。

Pfu DNA聚合酶.doc

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