Min6小鼠胰岛β细胞株|Min6细胞|种属鉴定 Cells Min6小鼠胰岛β细胞株|Min6细胞|种属鉴定 Cells Min6小鼠胰岛β细胞株|Min6细胞|种属鉴定 Cells 英文名称:Min6 品牌:普非生物 规格:T25 形态特性:咨询客服 生长特性:贴壁生长 培养条件:RPMI-1640 +10% FBS+50mM β-Mercaptoehanol 传代方法:1：2传代 冻存条件:无血清细胞冻存液
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贴壁细胞传代
1. 从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；
2. 用不含钙、镁的平衡盐溶液冲洗细胞（每10cm2培养表面积约2mL溶
液）；从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液，以避免搅动细胞
层，前后摇晃容器数次（注：冲洗步骤可去除可能抑制解离剂作用的少量
血清、钙和镁）；
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入预热的解离剂；试剂
量应足以覆盖细胞层(每10cm2大约0.5mL)；
4. 轻轻摇晃容器，使试剂完全覆盖细胞层；吸出多余解离试剂，T25 细胞
培养瓶留 200ul 左右即可；
5. 将培养容器在室温下孵育约 2分钟（请注意实际孵育时间根据所用细胞
系不同而有所差异）；
6. 在显微镜下观察细胞解离情况；如果解离程度未达 90%，可将孵育时间
延长几分钟，每 30 秒钟检查一次解离情况；也可轻轻拍打培养容器以
加快细胞解离；
7. 细胞解离程度大于等于 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流
尽；加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基；吹打细胞层表面
数次，使培养基分散；
8. 将细胞转移到15mL 无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟
（请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；
9. 用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照
推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，把
细胞放回培养箱（注：如果使用培养瓶，将其放入培养箱前应将瓶盖
旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气
性瓶盖）。
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