人类疾病的动物模型(Animal model of human disease)是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。
动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂,以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制,推动医药学的发展来之缓慢,临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性,而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究,可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素,以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究,有助于更方便,更有效地认识人类疾病的发生发展规律,研究防治措施。
(一) 移植性肿瘤裸鼠模型 移植性肿瘤动物模型,指把动物或人的肿瘤移植到同系、同种或异种锚点动物体内,经传代后,它的组织学类型明确,移植成活率、生长速度、自发消退率、宿主荷瘤寿命、侵袭和转移等生物学特性稳定,并能在受体动物中继续传代。研究者通常把可移植性肿瘤简称为移植瘤,也称瘤株。建立移植新肿瘤的基本要求是:模型来源可靠,生物学特性明确、实验周期合适、成瘤率高、操作简单、具有可重复性、易于推广应用等。目前研究最多的是人癌异种移植肿瘤裸小鼠模型,包括移位移植和原位移植。
●异位皮下移植:皮下移植是异位移植中最常用使用的部位,因其移植方法简便、肿瘤体积易于测量等优点而被使用广泛。
常规方法根据移植方式不同可分为肿瘤组织块移植法、肿瘤细胞悬液接种法、匀浆法、培养细胞接种法、腹水接种法等。
●原位移植:基于原位移植理论发展起来的原位移植作为一种新的肿瘤移植方法,克服了皮下移植某些缺陷。原位移植不仅可以提高移植的成功率,而且所获得的移植瘤生物学特性更接近人体肿瘤的生物学行为,这些都是皮下成瘤不可比拟的。
常用方法:
肝癌原位移植(1)组织块移植法(2)细胞悬液接种法
乳房癌原位移植(1)组织块移植法(2)细胞悬液接种法
送样建议临床肿瘤组织标本放PBS或生理盐水里,全程4摄氏度保存;提供培养细胞的需保证细胞生长状态良好。 交付周期接种瘤组织块或细:组织块准备需1-2天工作日;培养细胞2-3周;观察记录肿瘤生长情况4-5周。交付结果详细实验报告,肿瘤生长记录、瘤块拍照,其他个性化定制等。实例结果
上图:异位皮下移植模型
右图:乳腺癌细胞原位移植裸鼠模型
(二) 肿瘤转移裸鼠模型 肿瘤转移是恶性肿瘤最重要的生物学特性之一,肿瘤转移机制及抗肿瘤实验研究不可能完全利用人体活检和尸检材料去完成,必须建立相应的动物及人类肿瘤动物转移模型,特别是高转移模型,这对研究肿瘤的转移机制和进行肿瘤防治的探索是及其重要的工具和手段。
肿瘤转移动物模型的建立原则
转移率要高,转移的靶向性要强,这样便于实验研究和结果分析。
生物学特性特别是转移特性稳定,体内、体外传代后转移特性不变,实验重复性良好。
建立的模型要简单易行便于推广。
要尽量模拟临床人类肿瘤转移的模式,体现肿瘤转移的全过程。
实验需要时,可建立相应的实验性肿瘤转移动物模型。如研究肝转移时可建立肿瘤细胞脾内接种模型,研究肺转移时可建立肿瘤细胞尾静脉接种模型等。
●尾静脉接种转移模型 这种方法建立的转移模型主要发生肺转移,后期可能伴随其他器官的转移。该模型特点是操作简单,转移快,根据瘤细胞的恶性程度及移植转移潜能不同,其转移率稍有不同,常用来筛选抗肿瘤转移药物。●脾脏接种转移模型脾内接种胃肠道或结肠癌细胞可以产生肝转移,但这种模型仅能代表胃肠道癌肝转移的最后阶段,因而被称之为实验性肝转移模型,该模型是研究肝转移常用的模型。 操作较为复杂,需要一系列的外科操作。一般情况下3-4周后较多肿瘤细胞系的肝转移率可达70%以上。●皮下移植转移模型皮下移植是建立血道转移模型最常用的方法,移植部位常常在背侧近掖部皮下。操作简单,便于观察。虽然皮下移植的肿瘤常因包被纤维膜(假包膜)而不易发生局部侵袭和转移,但一些瘤株还是能够发生转移,少数伴发肝、脾或淋巴结的转移,接种时可以是细胞悬液也可以是肿瘤组织块,前者优点是可以定量,后者优点是肿瘤生长和转移较好。送样建议
临床肿瘤组织标本放PBS或生理盐水里,全程4℃保存;
提供培养细胞的需保证细胞生长状态良好。
交付周期
肿瘤组织块成瘤的需4-5周;
培养肿瘤细胞成瘤的需6-9周。
交付结果
肿瘤生长记录、瘤块拍照,其他个性化定制。
实例结果
肺转移模型切片染色
脾脏注射肝转移模型
(三) 溃疡性结肠炎小鼠模型 葡聚糖硫酸钠(DSS)是由蔗糖合成的一种硫酸多糖,具有与肝素同样的抗止血及抗凝血作用。DSS诱发结肠炎症的机制目前尚不十分清楚,可能与DSS影响DNA合成,抑制上皮细胞增生,破坏肠粘膜屏障有关。肠粘膜屏障功能被破坏后,肠腔内抗原进入粘膜和粘膜下层,引起继发性炎症反应,而肠道吞噬细胞清除细菌毒性产物的功能被削弱则使肠道炎症持续。
交付周期
2-3周
交付结果
完整实验报告,结肠石蜡切片、HE染色图、疾病统计指数评分统计和冻存的结肠组织。
(四) 新生儿结肠坏死大鼠模型 新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)是新生儿期的一种严重威胁患儿生命及新生儿重症监护病房(NICU)最常见的胃肠道急症,常见于早产儿。临床上以腹胀、呕吐、腹泻、便血为主要临床症状,随病情发展至严重时可发生休克、多器官功能衰竭及全身炎症反应综合征,其临床上治疗手段主要为抗生素、微生态制剂及外科手术。NEC的病因及发病机制目前还未完全阐明,通过建立动物模型模拟人新生儿的结肠坏死病,为研究NEC发病机制和提高治疗水平具有重大意义。
交付周期
6周
交付结果
完整实验报告,石蜡切片、HE染色图、冻存结肠样品。
(五) 脓毒血症大鼠模型 脓毒症(sepsis)是指由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS)。一般认为脓毒症是由感染引起,但是一旦发生后,其发生发展遵循其自身的病理过程和规律,故从本质上讲脓毒症其实是一种机体对感染性因素的过激反应。发病时可伴随着器官功能障碍,组织灌注不良或低血压,严重时的低血压会在给予足量的液体复苏后仍然无法纠正的持续性症状。
脓毒血症的发病原因可以为任何部位感染引起,包括肺炎,胸膜炎,胆管炎,其病原体包括细菌,真菌,病毒及寄生虫等。
因为脓毒血症的发病涉及到复杂的全身炎症网络效应、基因多态性、免疫功能障碍、凝血功能异常、组织损伤以及宿主对不同感染病原微生物及其毒素的异常反应等多个方面,加上其与机体多系统 ,多器官兵力生理的改变密切相关,所以还无法确认脓毒血症的发病机制。
交付周期
3周
交付结果
可提供各类组织石蜡切片,HE染色,冻存组织等。
其他人类疾病动物模型制备实例:
肥胖:ob/ob小鼠、高脂饮食诱导
缺血:肝脏缺血再灌注、急性心肌梗死、结肠缺血
消化系统:非酒精性脂肪肝、溃疡性结肠炎
除此以外,糖尿病:链脲佐菌素诱导、高脂饮食诱导;呼吸系统:COPD模型;疼痛:急性:1.腹腔-醋酸;2.脚趾-福尔马林;慢性:1. 弗氏佐剂;2.坐骨神经结扎;神经系统:脊髓损伤、坐骨神经损伤,均成功构建,其他动物模型欢迎咨询陈经理(13925100453)。
【以上实例结果均为永诺生物自主实验整理所得,请勿随意盗用,更多资讯欢迎致电020-84298069】