研选动物基因组DNA提取试剂盒/适合动物的各种组织、细胞/核酸提取及纯化试剂/擎科生物TSINGKE

¥450
擎科生物
中国
2021-06-04 13:51

北京擎科生物科技有限公司

我要认领
北京擎科生物科技有限公司
张楠
18622657960
zhangnan@tsingke.net
产品属性
保存条件20-25℃室温保存,避免阳光直射
保质期20-25℃室温保存,避免阳光直射
数量10000
供应商北京擎科生物科技有限公司
规格50次
产品说明
动物基因组DNA提取试剂盒
适合动物的各种组织、细胞

【产品说明】
本试剂盒采用独特的缓冲液体系配合特异性吸附DNA的心柱,可以从新鲜及冻存的全血、血浆、血清、白膜层、淋巴细胞、动物组织、细胞、革兰氏阴性菌等样本中简单、快速、高效地分离出DNA。获得的基因组DNA完整性号、纯度高、质量稳定,是PCR扩增、限制性酶切反应、Southern杂交以及基因组测序等分子生物学实验最佳的选择。

【试剂盒组成】


【实验样品准备】
(实验前请先阅读注意事项) :
1.血液样品的准备:将血液样品充分融化后混匀。若待处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血,其红细胞为有核细胞,血液样本量为5~ 20 μl,可加入PBS缓冲液补足至200 μ后进行后续实验。
2.组织样品的准备:将组织于组织研磨器中充分研磨碎(或使用干净的剪刀剪碎)转入离心管中,对于不易消化的动物组织,可于液氮中研磨后再消化。若提取精液DNA,取20~200 μ精液,于12,000 x g离心5min,加入500 μI PBS缓冲液洗涤2次,收集细胞沉淀进行消化。
3.细胞样本的准备:
3.1收集悬浮细胞:计算细胞数目,吸取所需体积细胞培养液,300 x g离心5min,小心将上清完全吸弃,切勿吸走细胞沉淀。
3.2收集贴壁细胞
3.2.1通过胰蛋白酶消化收集细胞:计算细胞数目,吸净细胞培养液,用PBS缓冲液洗涤细胞1次,加入终浓度为0.1 ~ 0.25%的胰蛋白酶(自备),当细胞从培养瓶上脱落后收集所需体积细胞,300 x g离心5 min,小心将上清完全吸弃,切勿吸走细胞沉淀。
3.2.2使用细胞刮铮收集细胞:
计算细胞数目,用细胞刮铮将细胞从培养瓶上刮下,取所需体积细胞培养液,300 x g离心5 min,小心将上清完全吸弃,切勿吸走细胞沉淀。

【产品特点】
简单快速:1h内即可获得超纯的基因组DNA。
应用广泛:适用于动物各种样本及部分微生物基因组DNA的提取。

【保存条件】
20-25℃室温保存,避免阳光直射。

【注意事项】
1、Proteinase K于-20℃冰箱冻存,每次使用后立即放回-20℃冰箱。
2、检查Buffer gA1、Buffer PW是否有固体析出,如有析出,请置于37℃水浴中溶解摇匀。
3、Buffer PW和Wash Buffer首次使用需加入指定量的无水乙醇,每次使用完后立即盖紧盖子,防止酒精挥发,影响提取效果。
4、Buffer gA1和Buffer PW中含有胍盐,操作时应戴手套,避免与皮肤直接接触。

【实验步骤】
1.将Spin Column置于Collection Tube中,加入250 μI Buffer BL,12,000 x g离心1 min,活化硅胶膜。
2.样品消化
2.1血液样品的消化:取20 μl Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 μ l充分混匀的全血样品,涡旋振荡10s;再加入200 ul Buffer gA1,旋涡振荡10s,70°C孵育15min,期间震荡1 ~ 2次。
V全血: Buffer gA1 : ProteinaseK=10: 10: 1
注意: -20°C及以下全血样品可长期保存,2 ~ 8°C保存时间不宜超过10天。如使用长期保存于2 ~ 8°C的样品,可延长孵育时间5 ~ 10 min。
2.2组织样品的消化:取20 μI Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 μ高纯水稀释后的组织碎片,涡旋振荡10s;再加入200 μl Buffer gA1,旋涡振荡10s,56°C孵育1 ~ 3 h或过夜,期间震荡3 ~ 5次。
2.3细胞样本的消化:取20 μl Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 μ |高纯水悬浮的细胞沉淀,涡旋振荡10s;再加入200 μIBuffer gA1,涡旋振荡10s,56°C孵育0.5~ 1 h,期间震荡3 ~ 5次。
3.孵育结束后加入200 μ |无水乙醇,涡旋振荡混匀。
V无水乙醇≈(V样品+ VBuffer gA1)/2
4.将步骤3所得溶液全部转入Spin Column中,12,000 x g离心1 min,弃废液。
5.向Spin Column中加入500 μ | Buffer PW (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 x g离心30s,弃废液。
6.重复步骤5一次。
7.向Spin Column中加入500 μ IWash Buffer (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 x g离心30s,弃废液。
8.将Spin Column放回Collection Tube中,12,000 x g离心2 min,开盖晾干1 min。
9.取出Spin Column,放入一个干净的1.5 mI离心管中,在吸附膜的中央处加50~ 100 μl TE Buffer ( 65°C预热5 min洗脱效果更佳),20~ 25°C .放置2min,12,000xg离心2min。如果需要较多量DNA,可将得到的溶液重新加入Spin Column中,离心2 min。注意:洗脱体积越大,洗脱得率越高。若需得到较高浓度的DNA,可以适当减少洗脱体积,但最小体积应不少于50 μl, 体积过小会降低DNA洗脱得率,降低产量。


【常见问题】
1.提取全血基因组,过柱子的时候,发现有时候吸附柱会堵塞。原因分析及解决办法:
(1)Proteinase KBuffer gA1加入顺序不对。某些客户是把血液、Proteinase KBuffer gA1三者混合起来,再涡旋振荡,这样会导致Proteinase K对血液的裂解效果不理想。建议是先加Proteinase K,再加血液,涡旋混匀,最后加Buffer gA1混匀。
(2)提取的血液量过多。说明书中要求加200ul全血,20ul Proteinase K200ul Buffer gA1;如果提取的血量增加,应该按比例增加Proteinase KBuffer gA1的用量。
推荐用量比例是V全血: Buffer gA1 : Proteinase K =10 : 10 : 1

2.提取某些软体海洋生物的基因组,发现有时候洗脱得率不高。
原因分析及解决办法:
某些软体海洋生物样本含糖分比较多,如果直接裂解会导致裂解液粘稠,严重的时候会堵塞吸附柱,这样就造成DNA得率不高。建议是将软体海洋生物组织放在液氮中冻存一段时间,取少量组织进行充分液氮研磨后再进行后续的提取操作。


【数据事例】
人的基因组DNA提取结果

干血片DNA提取结果

批量口腔拭子DNA提取结果



【实验案例】
动物基因组试剂盒提取全血基因组使用动物基因组提取试剂盒,从冻存的全血样本中快速分离出基因组DNA
【样品】冻存的全血样本
【样品准备】
将冻存的血液样品充分融化后混匀。
【操作步骤】
1.活化硅胶膜
将吸附柱放入收集管中,加入250 ul Buffer BL12,000 g离心1 min,活化硅胶膜。
2.样品消化
(1)20 ul Proteinase K1.5 ml离心管底部,然后加入200 ul充分混匀的全血样品,涡旋振荡10 s
(2)加入200 ul Buffer gA1,旋涡振荡10 s70℃孵育1 h,期间震荡1 ~ 2次。
3.孵育结束后加入200 ul无水乙醇,涡旋振荡混匀。
4.将步骤3所得溶液全部转入吸附柱中,12,000 g离心1 min,弃废液。
5.向吸附柱中加入500 ul Buffer PW12,000 g离心30 s,弃废液。
6.重复步骤5一次。
7.向吸附柱中加入500ul Wash Buffer12,000g离心30 s,弃废液。
8.将吸附柱放回收集管中,12,000g离心2 min,开盖晾干1 min
9.取出吸附柱,放入一个干净的1.5 ml离心管中,在吸附膜的中央处加50 ul TE Buffer,室温放置2 min12,000 g离心2 min。如果需要较多量DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心2 min

【结果】

DNA Marker, DL5000 (TSJ012-100/500);样品1-5:全血样本。
【数据来源】
青岛大学附属医院马老师
【来自老师的评语】
以前我们用过其他公司专门提取血液基因组的是试剂盒,血液用量比较大,效果也一般,胶图背景脏;擎科这款动物基因组提取试剂盒属于通用型的,可以一盒多用这点是非常不错的,而且提取的时候血液用量少,提取效果也能满足我后续的实验要求,挺不错的一款产品。


【公司简介】
北京擎科生物科技有限公司(Tsingke Biotechnology Co., Ltd.)是一家为生命科学领域提供技术服务及产品的国家高新技术企业。公司深耕于基因合成技术及其上下游产品的开发应用,业务范围涵盖生命科学服务及产品、工具酶及合成生物学产品、生物制造CRO/CDMO开发与生产服务三大方向。公司肩负推动生物科技发展、让世界更美好的使命,秉承品质、创新、共赢、奋斗的价值观,始终将行业需求作为公司的导向,为客户提供基因测序、DNA/RNA合成、分子生物学试剂、合成仪等仪器设备、化学合成原材料以及多种科研项目服务。

作为基因合成领域的佼佼者,经过多年的数据和经验积累,专注于合成生物学研发及应用平台搭建,形成了完整的基因合成产业链和完善的服务体系,业务覆盖全国并延伸至美国、德国等多个海外国家和地区,累计为全球约12万用户提供服务与产品。

作为国家高新技术企业、北京市知识产权试点单位,擎科生物注重自主研发的同时,通过多领域专业人才的引进,不断发展和完善核心技术创新研发体系。参与多项国家及省部级科技研发项目,同时参与制定了国家及行业相关标准。自公司成立以来,先后与天津大学、浙江工业大学、天津工业生物技术研究所等多家高校和科研院所进行战略合作,并与知名院士团队共建生物技术联合创新中心,进行校企合作、培育行业人才,实现产学研一体化,引领合成生物学的创新发展。

擎科生物致力于为从事生命科学研究的科研人员及企事业单位提供高质量、本地化的生物技术服务和产品,公司已通过CNAS质量体系认证,拥有符合生物医药诊断标准的10万级洁净生产车间和自动化生产设备,以及超过12000m2的创新研发中心。截至2020年11月,擎科生物拥有91项专利及核心技术,其中40多项发明专利,使用擎科生物服务和产品客户发表文章累计超过3100篇,影响因子累计超过1万。

北京擎科生物科技有限公司
电话:400-668-3730
地址:北京市经济开发区经海四路156号院5号楼401
网址:www.tsingke.com.cn


本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。