酵母双杂交系统

¥9717
clontech
USA
2021-06-04 13:54

我要认领
王先生
15210716102
15210716102@139.com
产品属性
英文名Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System
供应商北京博迈斯
规格each
产品说明

产品特点:

非常低的假阳性率

4个报告基因,包括Aureobasidin A抗性基因

简便的酵母接合操作流程和多种兼容的“Mate & Plate™”文库

产品概述:

Matchmaker™Gold Yeast Two-Hybrid System是Matchmaker产品线中最高效的产品,这个系统采用了一个新的酵母菌株(Y2HGold),该菌株含有Aureobasidin A抗性报告基因,适用于高水平表达的载体及文库筛选。利用Matchmaker Gold可识别新的蛋白质之间的相互作用,验证预期的相互作用,以及确定相互作用的区域。

Aureobasidin A可有效降低背景水平

Matchmaker Gold系统使用了一种新的抗生素Aureobasidin A (AbA) 抗性报告基因,这种高效的抗生素可杀死酿酒酵母细胞。Y2HGold酵母细胞中一旦产生了阳性的诱饵-猎物蛋白质相互作用,AUR1-C基因的表达产物可以使酵母细胞在含有AbA的培养基中生长。由于AbA可杀死无抗性的酵母细胞,因此背景克隆就没有机会生长,即使在严谨性很低的初步筛选中也能得到高比例的真阳性克隆。如果单独使用营养缺陷筛选,则需要优化条件,而AbA抗性筛选无需条件优化,并且避免了背景克隆的干扰。

为什么使用4个报告基因?严谨性更高!

单独使用HIS3营养缺陷型报告基因的酵母双杂交系统,通常会产生较多的背景克隆和假阳性。背景克隆是由于HIS3的泄漏表达导致的,而假阳性是由猎物蛋白质自主激活报告基因所引起的。
Matchmaker Gold系统的严谨性基于四个可选择的报告基因:AUR1-C, HIS3, ADE2和MEL1(α=galactosidase),分别由3个不同的GAL4应答启动子驱动其表达(图1)。各种严谨调控的报告基因的结合使用,可有效降低假阳性,例如文库猎物蛋白质可能会直接结合某个启动子序列,但是不能结合所有的3个启动子序列。Matchmaker Gold是唯一拥有四个真正的报告基因和利用Aureobasidin A抗性的酵母双杂交系统,文库筛选的背景低,严谨性很高。 

方便的培养基系列产品和酵母菌落PCR鉴定试剂盒

预制的Yeast Media Set 2 Plus包含一整套用于Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid的酵母培养基,Aureobasidin A和X-α-Gal。预制的Matchmaker Insert Check PCR Mix 2即用型混合物可快速扩增酵母克隆中文库载体的cDNA插入片段。该试剂盒可与Matchmaker Gold单杂交和双杂交文库筛选系统配套使用,可以快速扩增、分选和分析阳性克隆中的cDNA插入片段。

蛋白质之间的相互作用可以激活Y2HGold酵母菌株中的4个可选的报告基因,这些报告基因基于3个不同的GAL4-应答启动子。