UCF.METM Nuclease 全能核酸酶

¥418
YEASEN
2021-06-04 13:58

翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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翊圣生物
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daiyanling@yeasen.com
产品属性
保存条件-20℃
英文名UCF.METM Nuclease
供应商翌圣生物科技(上海)有限公司
规格25KU
产品说明
产品信息
产品名称产品编号规格储存价格
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶20156ES2525 KU-20℃418.00
20156ES5050 KU-20℃768.00
20156ES60100 KU-20℃1398.00
产品描述
UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M Urea0.1 M Guanidine HCl0.4% Triton X-1000.1% SDS1 mM EDTA1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNARNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,纯度>95%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.02 mM MgCl220 mM NaCl50%甘油)中,无色透明液体。
产品性质
来源E. coli
分子量(Molecular Weight26.5 kDa
等电点6.85
纯度(Purity≥ 95%SDS-PAGE
酶活(Enzyme Activity≥ 250 U/μL
比活(Specific Activity≥ 1.5×106 U/mg蛋白
最适pHOptimum pH8.0(工作范围pH 6-10
最适温度(Optimum Temperature37℃(工作范围0-42℃
辅助因子(Cofactor1-10 mM Mg2+
蛋白酶活性(ProteaseUndetected
储存缓冲液(Storage Buffer20 mM Tris-HCl pH8.02 mM MgCl220 mM NaCl50%甘油
活性单位定义(Unit Definition37℃pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
推荐使用条件
条件参数最佳条件有效条件
Mg2+1-2 mM1-10 mM
pH8-96-10
温度37℃0-42℃
DTT0-100 mM>0 mM
巯基乙醇0-100 mM>0 mM
单价阳离子0-20 mM0-150 mM
磷酸根离子0-10 mM0-100 mM
推荐使用量和处理时间
UltraNuclease用量(终浓度)处理时间
0.25 U/mL> 1 h
2.5 U/mL15 min
25 U/mL2 min
使用方法
  1. 样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease,也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
4、上清获取
12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。

【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
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产品名称货号规格
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HB210309