液体样本天门冬氨酸氨基转移酶(谷草转氨酶)AST/GOT活性检测试剂盒(赖氏法) E2023

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普利莱
北京
2021-06-04 14:00

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供应商普利莱
规格100次/200次
产品说明
液体样本天门冬氨酸氨基转移酶(谷草转氨酶)AST/GOT活性检测
试剂盒(赖氏法)E2023
描述:天门冬氨酸氨基转移酶又称谷草转氨酶、天门冬氨酸氨基转换酶,英文名称Aspartate transaminase(简称AST; aspartate aminotransferase(简称:AspAT/ASAT/AAT; serum glutamic oxaloacetic transaminase(简称SGOTGOT) 。在机体中以心肌含量最为丰富,其他组织如:肝脏、肌肉、肾、肺也含有此酶。急性心肌梗塞、急性肺炎、极大手术后此酶的活性明显升高。另外,在肝、肾、肺、心、胸膜等脏器发生炎性病变时都可见此酶活性中度或轻度的升高。试剂盒可以测定血清、血浆等样本中谷草转氨酶活性。


适应范围:本试剂盒可以检测血清、血浆或组织匀浆液上清中的谷草转氨酶的活性。
组成:(微板法 200)
组分规格保存条件
标准品1ml-20℃避光保存
底物缓冲液10ml4℃避光保存
PB缓冲液1ml4℃保存
显色剂:10ml4℃避光保存
终止试剂100ml常温保存
储存:以上组分按要求保存,6个月有效。
操作步骤:
. 样品准备:(以血清为例)
收集血液,室温静置2h4℃过夜,600g离心10分钟,移取上清至另一新的离心管中,4 ℃保存备用。(如果超出线性范围,可以适量生理盐水稀释后再测定
.酶活力测定:
1. 标准品工作液的配制:按下表用底物缓冲液和PB缓冲液将标准品稀释成01.1ug2.2ug3.3ug4.4ug5.5ug七个浓度,充分混匀。0浓度孔只加底物缓冲液和PB缓冲液,以此作为空白孔调零,按照下述操作步骤操作,而后在520nm处读吸光度OD值,绘制标准曲线。
使用分光光度计测定,标准品工作液稀释比例:
PB缓冲液(ul101010101010
底物缓冲液(ul504540353025
标准品(ul0510152025
对应微克数01.12.23.34.45.5
使用酶标仪测定,标准品工作液稀释比例:
PB缓冲液(ul444444
底物缓冲液(ul201816141210
标准品(ul0246810
对应微克数00.440.881.321.762.2

2. AST活性测定:
参照下表使用分光光度计进行操作。
标准品工作液样本管样本对照管空白管
样本(ul--1010--
标准品工作液(ul60------
蒸馏水(ul------10
底物缓冲液(ul--50-----
充分混匀,37℃,孵育30分钟
底物缓冲液(ul----5050
充分混匀,37℃,孵育20分钟
终止试剂(ul500500500500
充分混匀室温静置10分钟,于波长520nm使用分光光度计测定各标准品和样本管吸光度值,注意设置样品空白管。

使用酶标仪测定反应体系:
标准品工作液样本管样本对照管空白管
样本(ul--44--
标准品工作液(ul24------
蒸馏水(ul------4
底物缓冲液(ul--20-----
充分混匀,37℃,孵育30分钟
底物缓冲液(ul----2020
充分混匀,37℃,孵育20分钟
终止试剂(ul200200200200
充分混匀室温静置10分钟,于波长520nm酶标仪测定各标准品和样本管吸光度值,注意设置样品空白管。

三、AST酶活力计算:
以微克数为x轴,测得的吸光度OD值为y轴,绘制标准曲线,根据标准曲线计算样本对应的质量,然后根据AST酶活力单位计算公式,计算AST酶活性。
酶标仪测定,AST酶活力:
未稀释样本AST酶活力 =(样本管微克数-样本对照管微克数)×250/2.5
稀释样本AST酶活力=(样本管微克数-样本对照管微克数)×稀释倍数×250/2.5
分光光度计测定时,AST酶活力:
未稀释样本AST酶活力 =(样本管微克数-样本对照管微克数)×100/2.5
稀释样本AST酶活力=(样本管微克数-样本对照管微克数)×稀释倍数×100/2.5
AST活力单位定义:每毫升样本在37℃与底物作用30min后,能产生2.5ug的为一个谷草转氨酶活力单位。

说明:
1谷草转氨酶的正常参考值为050U
2标准曲线上数值在20100U是准确可靠的,超过200 U 时,需将样品稀释。
3溶血标本不宜使用,因血细胞内转氨酶活力较高,会影响测定结果。