实验原理
原位杂交技术（in situ hybridization）是以标记的核酸分子为探针，在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针，在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交，再以放射自显影或免疫细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。可检测 mRNA、microRNA、LncRNA、DNA，也可应用于各种种属来源的标本，包括哺乳动物、植物标本等，也可应用于组织芯片。

技术原理
原位杂交（in situ hybridization）是应用已知碱基顺序并带有标记的核酸探针与组织、细胞等样本中待测目的基因按碱基配对原则进行特异性结合而形成的杂交体，然后再用与标记物相应的检测方法，在被检测的核酸原位形成带颜色的杂交信号，从而在显微镜下进行目的基因的定位检测观察。主要检测方法分为DAB显色和荧光显色两种。

实验流程

案例展示：

注意事项
1、固定液的选择及固定时间
 石蜡组织建议用10%中性缓冲福尔马林（含1/1000 DEPC）固定1～24h，其它固定液对实验结果可能产生一定的影响。
2、组织切片和载玻片的选择
组织切片4～5μm 厚，过厚或过薄的切片均会对信号的强弱产生影响，而且切片应完整，质量良好，否则会在预处理时掉片。载玻片的选择建议使用防脱载玻片，有条件的可使用更好的阳离子或者阴离子专用载玻片，可有效防止脱片现象的发生。

3、实验过程中切片的预处理
切片预处理过程包括煮沸处理和蛋白酶消化。当组织处理不规范、切片过厚或烤片不足时，在煮沸过程中容易掉片，建议烤片温度在56℃过夜。煮沸过程中要严格控制实验温度和时间。

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