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- 免疫荧光试剂盒(兔源一抗)(FITC)规格
¥800-3800
研生
进口、国产
2022-08-10 20:33
我要认领上海研生实业有限公司
王经理
shyssw@126.com
产品属性
产品说明
操作步骤(仅供参考)：
1、免疫荧光试剂盒(兔源一抗)(FITC)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：免疫荧光试剂盒(兔源一抗)(FITC)规格
英文名称：Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Rabbit (FITC)
产品规格：400T|800T|1600T发货周期：1～3天
本试剂盒采用SABC系统，是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存，敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能明显提高敏感性及降低背景。FITC激发光波长为490-495nm，发射光波长为520-530nm，呈黄绿色荧光。保存条件4℃可保存一年，应避免冷冻。石蜡片染色步骤1.切片脱蜡至水。2.根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。3.封闭滴加稀释的正常血清封闭液(稀释比110),室温20分钟。甩干，勿洗。4.滴加适当稀释的一抗，37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。5.滴加稀释的生物素标记羊抗兔IgG(参考效价1100-200),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。6.滴加稀释的SABC-FITC(参考效价1100-200)，37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。7.水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2,6DIBROMOBENZALDEHYDE2,6二溴677132391Cyclohexene1carboxylic acid环6368282Ethylhexylamine2104756Nitroate cellulose sheets纤维素薄膜NBenzyl4piperidoneN苄啶3612202NNITROSOMORPHOLINEN亚啉59892Stearic acid硬脂211285Fluoroindole5吲哚399520(TRIISOPROPYLSILYL)ACETYLENE三异硅炔893430661,2,4Triazolo[4,3a]pyridin3(2H)one三唑6969717Methyl Lprolinate hydrochlorideL脯2133406Cyclobutanol环29192352Methoxy4nitroaniline2497529PAMINOBENZAMIDE GLYCINE对酰甘MANGANESE(II) ACETYLACETONATE酰锰(II)14024589山梨订购|咨询 规格： 50mg曲龙 124947 订购|咨询 规格： 50mg夏天无订购|咨询 规格： 1g玄参订购|咨询 规格： 1g茴香 100663 订购|咨询 规格： 0.2ml地红 62013041 订购|咨询 规格： 100mg维生素B1 订购|咨询 规格： 100mg炔诺 68224 订购|咨询 规格： 100mg阿奇质J 订购|咨询 规格： 50mg脱紫堇订购|咨询 规格： ,20mg/支；紫檀芪订购|咨询 规格： ,20mg/支;漆黄素 528483 订购|咨询 规格： ,20mg/支紫杉 33069624 订购|咨询 规格： ,20mg/支桑辛素；通关藤苷X 62596296 订购|咨询 规格： ,20mg/支灰毡忍冬皂苷 136849882 订购|咨询 规格： ,20mg/支
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