感受态细胞免费送！| 产品名称 | 规格 |
| stbl3感受态细胞 | 100ul |
| DB3.1感受态细胞 | 100ul |
| DH5a感受态细胞 | 100ul |
活动参与人群：仅限医院体系的工作人员
活动时间：2022年8月22日-2022年9月21日申请方式：点击右上角店内咨询按钮，回复你所需的“感受态细胞”名称+名字+联系方式+单位信息，就可以免费送了！（注意：不包邮哦~并且每个用户仅限申请一次，一次只能申请一种）产品说明：
理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态，通过处理使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的
流动性，这种孔洞会被细胞自身所修复。
实验流程：
A.从-80度冰箱中取出保存完好的感受态菌株（约100ul）,在超净工作台内操作，将融化的感受态甘油菌株用移液枪加入到100~150mlLB培养基中。
B.接种过感受态菌株的液体LB培养基放入摇床，以200~240r/mim速率继代培养3h~5h,使菌液浓度达标，即菌液分裂增殖到对数生长期（菌液在对数生长期活性最好）；从摇床中取出菌液，在超净工作台中吸取3ml菌液于石英皿中，与同一批次的LB液体培养基做对照，用分光光度计测量OD值，尽量使OD值保持在0.3~0.6之间。
C.用塑料泡沐盒盛装冰块，将盛有菌液的LB培养基埋入到冰块中，预冷20~30min。
D.在菌液预冷期间，将实验所用耗材（0.1mol/L的CaCl2溶液、15%甘油CaCl2混合液、75%酒精、1ml枪头、100ul枪头、1.5mlEP管、50ml离心管）放人超净工作台中再次紫外灭菌10~20min，灭菌完成后将上述材料再次预冷。
E.取出预冷的50ml离心管，在超净工作台内点燃酒精灯，并将已经在冰上预冷好的菌液从锥形中转移至50ml离心管中，然后将离心管放入低温离心机4°C，4000r/min离心3min以收集菌体。
F.离心完成后可以观察到菌体聚集在离心管底部呈白色或淡黄色（若菌体颜色不正常则可能存在菌株污染）；在超净工作台内倒尽上清液，并将离心管放置在冰上30s，使得残余LB上清流回离心管底部，再次用移液器枪头吸尽残留的LB上清。
G.在超净工作台中往装有菌体的离心管中倒入预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液(每50ml菌液所收集到的菌体加入10~20ml的CaCl2），用移液枪轻轻摧打，使菌体均匀的悬浮于CaCl2溶液中，盖上离心管盖。将上述所得盛有悬浮液的离心管插入到冰块中，冰浴20~30min。
H.冰浴完成后，将盛有悬浮液的离心管于低温离心机4°C，4000r/min离心3min，可以观察到经过CaCl2溶液处理的菌块（一般呈白色）再次聚集在离心管底部。同时用干净的泡沫盒盛装适量的液氮准备速冻感受态细胞。
I.在超净工作台倒掉上清CaCl2溶液，并往离心管里加入提前预冷的2ml15%甘油CaCl2混合液，用枪轻轻摧打混匀，使菌体均匀悬浮于混合液中（此时感受态细胞已经制备完毕）。
J.取出预冷的EP管，于超净工作台中开盖放置在冰盒上，然后将上一步离心管中的感受态细胞混合液用移液枪分装到每个EP管中（注意动作要快，以免室温影响感受态活性），每管约100ul感受态细胞混合液。
K.最后把分装有感受态细胞混合液的EP管盖上盖分批次丢入到液氮中速冻，全部速冻完毕后，统一用塑料袋收集（注意标明日期），放入-80°C冰箱保存。
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