产品概述
碘化丙啶(PI)染色液为Annexin V鉴定凋亡和坏死细胞辅助试剂。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可与双链DNA特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，PI可进入细胞内对DNA进行染色，与Annexin V搭配使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。
实验操作指南步骤
(注：本品仅在悬浮培养的细胞中验证，良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。)- 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。
- 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
- 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-荧光染色液和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
- 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。
- 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
保存条件
4℃可保存1年；碘化丙啶(PI)染色液需要避光保存。
注意事项
- 为获得最佳的使用效果，请在3-6个月内使用；
- 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；
- 荧光物质均易发生淬灭，进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，操作和存放过程尽量注意避光保存；
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
(本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗)
