ATP含量测试盒_微量法测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
储存条件:低温保存
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。测定原理:肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。自备仪器和用品:分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。试剂组成和配制:酸性提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1支,4℃保存;临用前加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。试剂二:液体1.5mL×1支,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入500μL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。试剂四:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂五:液体25mL×1瓶,4℃保存;标准液:液体10mL×1瓶,2μmol/mLATP标准液,4℃保存;
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30 min以上,调节波长到700nm,蒸馏水调零。
2、显色剂的配制:临用前请根据拟用显色剂体积(样本数×0.2 m L),按试剂四(mL):试剂五(mL)=1:5的比例配制。用多少配多少。
3、样本测定:
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 样本 | 10 | 10 | | |
| 标准液 | | | 10 | 10 |
| 试剂一 | 20 | | 20 | |
| 试剂二 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 试剂三 | 10 | | 10 | |
| 蒸馏水 | | 30 | | 30 |
充分混匀,37℃准确水浴30min 37℃水浴20min后,700nm下测定各管吸光值注意:空白管和标准管通常只需要各做一个。每个测定管设一个对照管。