土壤酸性蛋白酶(S-ACPT)测试盒_微量法

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晶抗生物
国内
2022-08-24 12:16

上海晶抗生物工程有限公司

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汤凡
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产品属性
产品说明





土壤酸性蛋白酶(S-ACPT)测试盒_微量法
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
储存条件:低温保存
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT中性环境下催化蛋白质水解与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理:
中性条件下,S-NPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、双蒸水

试剂组成和配置:
试剂一液体20mL×1瓶,4保存
试剂二粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入6ml蒸馏水充分溶解;用不完的试剂4保存;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入2mL试剂七,沸水浴加热溶解,然后加入8ml试剂一,充分混匀备用,用不完的试剂4保存;
试剂四粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入30ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4保存;
试剂五:液体8mL×1瓶,4保存
试剂六:液体1.5mL×1支,0.05mg/ml标准酪氨酸溶液4℃保存;
试剂七:液体5mL×14保存




测定操作:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2样本测定:
试剂名称测定管对照管
风干土样g0.020.02
试剂一(μL150
试剂μL150
混匀后,40水浴30min,振荡5-6次,使土样与反应液充分接触
试剂二μL5050
混匀,8000g 25℃离心10min,取上清液,在EP管中加入下列试剂
测定管对照管标准管
上清液(μL6060
试剂μL60
试剂四μL280280280
试剂μL606060
混匀,40水浴20min8000g 25离心10min,取上清液200μL680nm读取各管吸光值A
注意标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。