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操作步骤:实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡,如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、待测样品孔,空白孔加样品稀释液100μl,余孔加待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤,每孔加辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgG工作液,100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见孔内有明显蓝色,即可终止)。
5. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色),终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同,为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
6. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值),在加终止液后15分钟以内进行检测。
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样本要求:1、样本不能含叠氮na(NaN3),因为叠氮na(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验,若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。
实验禁忌:1. 实验请根据试剂盒内纸质说明书为准。
2. 实验前请仔细确认试剂盒在有效期内。
3. 不同的人胸腺肽Thymosin试剂盒费用生产批号不能混用。
4. 加样时样品量误差,校对加样器。
5. 剩余elisa试剂盒建议在实验后1个月内使用完毕。
上海酶联生物公司成立以来,一直秉着诚信、专业的经营理念为每一位客户提供真诚的服务,我们的服务理念是:做事不离诚信二字,恒古至今,唯有诚信才能赢得最后的胜利,感谢多年以来全国各个地方的兄弟姐妹们对的大力支持,希望
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