氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量测试盒_微量法

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晶抗生物
国内
2022-08-25 01:21

上海晶抗生物工程有限公司

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汤凡
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产品属性
产品说明





氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量测试盒_微量法
测定方法:微量法
产品规格:100管/96样
储存条件:低温保存

意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
AsA作为植物细胞一个重要生理指标,其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHAAsA的可逆的氧化型,在生物体内,与抗坏血酸共同组成氧化还原系统,具有电子受体的作用。

测定原理:
DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品:
低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:
试剂一:液体100 mL×1瓶,室温保存。
试剂二:液体16mL×1瓶,室温保存。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水充分溶解。
标准品:粉剂×1瓶, 4℃保存。临用前加入5.743 mL蒸馏水充分溶解;吸取0.1 mL上述溶液,加入0.9 mL蒸馏水,混匀,即为100μmol/L DHA





DHA测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到265 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min
3. 标准管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL标准液、160μL预热的试剂二和20μL试剂三,迅速混匀后于265nm比色,记录10s130s的吸光值A1A2A空白管=A2-A1
4. 测定管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL上清液、160μL预热的试剂二和20μL试剂三,迅速混匀后于265nm比色,记录10s130s的吸光值A3A4A测定管=A4-A3
注意:标准管只需测定一次。