NCTC 1469小鼠正常肝细胞系 传代时操作有哪些注意点

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冠导生物
中国(上海)
2022-09-05 16:24

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NCTC 1469小鼠正常肝细胞系 传代时操作有哪些注意点
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天最好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,最好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
NCTC 1469小鼠正常肝细胞系 传代时操作有哪些注意点
细胞生长特性:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:淋巴母细胞
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的最大利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
NCTC 1469小鼠正常肝细胞系 传代时操作有哪些注意点
细胞背景资料:1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝脏组织,表达H-2K抗原,鼠痘病毒阴性。
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
NCTC 1469小鼠正常肝细胞系 传代时操作有哪些注意点
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。

MHCC97H细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台)
HCT-8(HRT-18)细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
NB-4细胞系(人急性早幼粒白血病细胞冷藏平台)
6-Methoxypyridine-2-carboxylic Acid
6-BroMo-1,1,4,4-tetraMethyl-1,2,3,4-tetrahydronaphthalene
(3S,4S)-(+)-3,4-DiaMino-1-benzylpyrrolidine
2-BroMo-5-Methylbenzaldehyde
6-(tert-Butyl) 3-ethyl 2-aMino-4,7-dihydrothieno[2,3-c]pyridine-3,6(5H)-dicarboxylate, 95%
Detroit562细胞系(人咽头癌胸水转移细胞冷藏平台)
HCC1954细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
Jurkat,Clone E6-1细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
L5178Y细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
BT20细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
OSC-19细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
Hep-G2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Homophthalic anhydride
2-Methyl-1-(trimethylsiloxy)-1-propene
Phosphorus pentoxide
1,3-Dihydroxy-5-methylbenzene
1-(3-DIMETHYLAMINOPROPYL)-3-ETHYLCARBODIIMIDE METHIODIDE
BPH-1细胞系(人前列腺增生细胞冷藏平台)
HBdSMC细胞系(人膀胱平滑肌细胞冷藏平台)
COLO394细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HCC94细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台)
Pt K1(NBL-3)[PTK1]细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
PG49细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
DH82细胞系(狗肾恶性组织增生症细胞冷藏平台)
HPDE6-C7细胞系(人正常胰腺导管上皮细胞冷藏平台)
LAN-6细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
Caco2细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
AE1201细胞系(人肺转化细胞冷藏平台)
Methyl 6-broMo-2-naphthoate
1-Fluoro-3-iodobenzene, 99%
2-Fluoro-5-(trifluoroMethyl)benzeneboronic acid, 98%
2-EthylaMino-3-Methoxypyridine, 99%
2-Fluoro-4-nitrobenzoic acid
NCI-H2087细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
TF-1细胞系(人红系白血病细胞冷藏平台)
MLO-Y4细胞系(小鼠骨样细胞冷藏平台)
HMEC-1细胞系(人微血管内皮细胞冷藏平台)
‭Hca-F细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
HCC1008细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
3-Picoline-4-boronic acid HCl
HexaMethylbenzene, 98+%
4-AMino-L-phenylalanine hydrochloride heMihydrate, 99%
2-AMino-5-broMobenzotrifluoride
Ethyl Hexanoate
BC-019细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HConEpic细胞系(人结膜上皮细胞冷藏平台)
5637(HTB-9)细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
SNU-869细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台)
ALVA细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1915[H1915]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1581[H1581]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
DV-90细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
RPC细胞系(大鼠垂体细胞冷藏平台)
MDCK-2细胞系(狗肾细胞冷藏平台)
143TK细胞系(人胸腺激酶缺陷性细胞冷藏平台)
B16F10细胞系(小鼠黑色素瘤高转移细胞冷藏平台)
CEL细胞系(鸡胚原代肝细胞冷藏平台)
NCI-H1238[H1238]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H209细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
RD-ES细胞系(人尤因氏肉瘤细胞冷藏平台)
MM96L细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
3,4-Dichlorotoluene
Eletriptan hydrobromide
(3beta)-Androsta-5,16-diene-3,17-diol 3-acetate 17-(trifluoromethanesulfonate)
Grb7 ELISA Kit
KELLY细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
TK10细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
Reh细胞系(人急性淋巴细胞冷藏平台)
ECV-304细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台)
293FT细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
4-Chlorophenylhydrazine hydrochloride
3-Methylbutanamide, 97%
Harmalol hydrochloride hydrate, 98%
6-(Piperidin-1-yl)pyridin-3-ylboronic acid
Deoxyshikonin
CCLP1细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台)
SW403细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
BC3H1细胞系(小鼠脑瘤细胞冷藏平台)
CCRF-CEM细胞系(人急性淋巴细胞冷藏平台)
TALL-104细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
Nb2-11细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
KM-12-SM细胞系(人结肠癌肝转移细胞冷藏平台)
OSX ELISA Kit
Human free fatty acids,FFA ELISA Kit
DLD ELISA Kit
TAT ELISA Kit
OHβ ELISA Kit
HSP-40 ELISA Kit
Human PDIA2 ELISA Kit
Human schistosoma ELISA Kit
Ishikawa细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台)
A-375[A375]细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
SW 626[SW-626,SW626]细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台)
hBMSCs细胞系(人骨髓间充质干细胞冷藏平台)
NCTC clone 929细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
NCL-H460细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW1353细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
H-EMC-SS细胞系(人软骨肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H920[H920]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
3T3-Swissalbino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
2-Aminobenzenesulfonamide
Ethylamine,hydrochloride
Antioxidant 425;2,2'-Methylenebis(4-ethyl-6-tert-butylphenol)
FX ELISA Kit
Jurkat D,E细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台)
WIL2-S细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
NCI-H446[H446]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
8305C细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)
LS174T细胞系(人结肠癌肿瘤细胞冷藏平台)
Biphenyl-4-acetic acid 97%
2,2-dimethyl-3-morpholin-4-ylpropanal(SALTDATA: FREE)
6-Iodo-3 H -isobenzofuran-1-one
Sulfur Trioxide - Triethylamine Complex
Ethoxyamine hydrochloride
PLC/PRF/5细胞系(人肝癌亚力山大细胞冷藏平台)
JurkatD,E细胞系(人T淋巴瘤转基因细胞冷藏平台)
NCI-H1793细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
Kasumi-1细胞系(人急性淋巴白血病细胞冷藏平台)
HCC-95细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
U-937细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
AM-38细胞系(人脑胶质母细胞冷藏平台)
C4BPa ELISA Kit
GLP-1 ELISA Kit
Human ETFB ELISA Kit
ATF3 ELISA Kit
IL-4 ELISA Kit
IL5 ELISA Kit
HDV IgM ELISA Kit
Human NOSIP ELISA Kit
MC-38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H157细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
NRK49F细胞系(大鼠肾细胞冷藏平台)
HCPF细胞系(人脉络丛成纤维细胞冷藏平台)
NCI-H1781[H1781]细胞系(人细支气管肺泡癌细胞冷藏平台)
CAL27细胞系(人舌鳞状癌细胞冷藏平台)
KYSE510细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
trans-3,4,5-TriMethoxycinnaMic acid
2,4-Difluorophenylacetic acid
Hexahydroxybenzene
4-BroMothiophene-2-carboxaMide
3-AMino-4-hydroxy-5-nitrobenzene-1-sulfonic acid hydrate, 97%
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
NCI-H2023细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
USMC细胞系(大鼠平滑肌细胞冷藏平台)
Saos-2细胞系(人成骨肉瘤细胞冷藏平台)
SHZ-88细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
BSMSCs细胞系(牛骨骼肌卫星细胞冷藏平台)
NCI-H2195[H2195]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
hexyl isobutyrate
Silane, trichloro(3-phenylpropyl)-
propylmagnesium chloride
oleyl acetate
2-METHOXY-4-METHYLBENZENESULFONYL CHLORIDE
U-2OS[U2OS,U2-OS,U-2OS]细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2228[H2228]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
UMC-11细胞系(人肺良性肿瘤细胞冷藏平台)
MV-4-11细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台)
B16-F1细胞系(小鼠黑色素瘤细胞冷藏平台)
HEC-1-B细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
RIN-m5F细胞系(大鼠胰岛β细胞冷藏平台)
LU99A细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
COLO205细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
SNU-C1细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HVSMC细胞系(人血管平滑肌细胞冷藏平台)
4-BroMo-2-chloro-N-(2-fluorobenzyl)aniline, 97%
(R)-(+)-3-Hydroxy-3-phenylpropionic acid, 98+%
2-Chloro-N-n-propylbenzaMide, 97%
Benzyl Methacrylate
Quercetin 3-rhaMnoside
HUP-T3细胞系(人胰腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H211[H211]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
H3255细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
K562细胞系(人慢性髓系白血病细胞冷藏平台)
SUSM-1细胞系(人肺成纤维细胞冷藏平台)
KLE细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
Nitrosobenzene
2-Hydrazinyl-6-Methylpyridine
1,2-Dihydronaphthalene, 96%
Potassium hydroxide
2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid
FAO细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
RAOEC细胞系(大鼠血管内皮细胞冷藏平台)
INS-1细胞系(大鼠胰岛细胞冷藏平台)
MDA-MB-361细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1563[H1563]细胞系(人胚肺细胞冷藏平台)
KYSE30细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
MHCC97-L(MHCC97L)细胞系(人低转移肝癌细胞冷藏平台)
NCI-H2029[H2029]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
KFB细胞系(人肾成纤维细胞冷藏平台)
SNU-398细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
T3T-L1细胞系(小鼠脂肪细胞冷藏平台)
BIU-87细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
LoVo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H1437[H1437]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
GAK细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
CCC-HHM-2细胞系(人胚心肌组织来源细胞冷藏平台)
Pt K1(NBL-3)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
1-Bromo-4-butylbenzene
poncirin
1-benzyl-3-pyrroline
GR ELISA Kit
IOSE80细胞系(人正常卵巢上皮细胞冷藏平台)
NCI-H82细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Mono-Mac-6细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
MEF(CF-1)细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
HME6细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
Boc-dl-2-Aminotetralin-2-carboxylic acid
(-)-(5aS,10bR)-5a,10b-Dihydro-2-(2,4,6-trimethylphenyl)-4H,6H-indeno[2,1-b][1,2,4]triazolo[4,3-d][1,4]oxazinium Chloride Monohydrate
Methyl diphenylphosphinite, 99%
4-Chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-ol
5-Iodo-3-methyl-2-pyridinamine
NCI-H865[H865]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
T47D细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
NCI-H250[H250]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HEC1-B细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
SW579[SW 579,SW-579]细胞系(人甲状腺鳞癌细胞冷藏平台)
SW620[SW620,SW-620]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
HONE-1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
C8γ ELISA Kit
Human HDAC6 ELISA Kit
Human GPX1 ELISA Kit
26S-PSM ELISA Kit
IL-4 ELISA Kit
IL2 ELISA Kit
AZT ELISA Kit
Human PCDHβ12 ELISA Kit
Kuffer细胞系(人肝枯否细胞冷藏平台)
HT1080细胞系(人成纤维肉瘤细胞冷藏平台)
RL95-2细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
Hep G2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)