HPMEC;人肺微血管内皮细胞
【产品编号】 C0580
【中文缩写】 HPMEC细胞
【中文名称】 HPMEC(人肺微血管内皮细胞)
【背景资料】 见细胞说明书
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养PBS量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高PBS量到15%,待细胞稳定后,调回PBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细胞活力。复苏细胞注意事项:
1收到细胞后当天换液,全部更换成客户自己的新鲜培养基,放进培养箱,第二天再消化。
2边观察边消化,根据细胞的形态,终止消化时间,采取以半分钟间隔吹打细胞边缘,如可吹打下来,即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。
3随细胞有一份细胞操作说明书,请客户仔细查看。
4记得加1%双抗,HPMEC;人肺微血管内皮细胞降低被污染的概率。另外尽早冻存留种,以备后用。
5售后时间为一周,仅限于细胞本身的质量问题,而因乙方自己不当操作(不规范操作,消化过度,不加双抗导致的污染等)导致的细胞问题不在售后范畴。
6收到细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请您务必重视。
7刚收到细胞时,胎牛血清可以用15%培养两三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞状态稳定后,再调回10%即可。
(其中1,2条针对于贴壁细胞,悬浮细胞详情请见细胞操作说明书)" P4
【产品包装】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
【产品规格】 1*10(6)
【安全级别】 1
【产品种属】 人
【组织来源】 肺微血管
【细胞形态】 上皮细胞样
【细胞特性】 贴壁
"细胞培养基的选择和使用:
MEM:成分简单,贴壁细胞首选。
DMEM:HPMEC;人肺微血管内皮细胞分高糖型和低糖型。
IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养。
RPM1640:应用最广泛的培养基之一。悬浮细胞培养首选,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞。
199、109培养基:成分齐全,培养效果较好。
F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养。
F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养。
McCoy’s5A培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。" 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
几种实验室细胞培养基成分的作用:
1.NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定。
2.丙酮酸钠的作用是什么?丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。
丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM.
3.HPMEC;人肺微血管内皮细胞加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸氢盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中。
4.酚红的作用是什么?酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。
5.谷氨酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有胶高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。
试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。C1823 OPM-2细胞 ,公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!
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