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- 上海博尔森生物科技有限公司
- BY4742感受态细胞
￥338
博尔森/BIOESN
中国/美国
2022-09-06 08:35
我要认领上海博尔森生物科技有限公司
陈环环
bioesn@163.com
产品属性
产品说明
BY4742感受态细胞
产品储存：-80 ℃保存，一年有效。
产品组成：
基因型: MAT alpha, his3Δ1, leu2Δ0, lys2Δ0, ura3Δ0
使用方法：
1. 取 100 µL 冰上融化的感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒 2-5 µg，Carrier DNA(95-100 ℃，5min，快 速冰浴，重复一次)10 µL，PEG/LiAc 500 µL 并吸打几次混匀，30℃水浴 30 min (15 min 时翻转 6-8 次混匀)。
2. 将离心管放 42℃水浴 15 min (7.5 min 时翻转 6-8 次混匀)。
3. 5000 rpm 离心 40 s 弃上清，ddH2O 400 µL 重悬，离心 30 s 弃上清。
4. ddH2O 50-100 µL 重悬，涂板，29℃培养 48-96 h。
注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 同时转化 2-3 种质粒时可增加质粒的用量。
4. 一般酿酒酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为 27-30℃；高于 31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
5. 菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的 Adenine 被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成 Adenine 以供利用，然而，有些菌株的 ADE2 基因被破坏，Adenine 合成途径受阻；又由于其 ADE4,5,6,7,8 基因均正常，所以造成中间产物 P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
6. 酵母在缺陷培养基中生长速度比 YPDA 培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂 YPDA 平板 29℃，48 h 培养可见直径 1 mm 克隆；涂 SD 单缺平板 29℃，48-60 h 培养可见直径 1 mm克隆。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！ 平台客服
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