的荧光成像。 染色方案
以下是使用荧光α-Bungarotoxin 标记物对
大鼠骨骼肌的 10 um 厚的新鲜冷冻切片进行染
色的示例操作规程，针对其他应用可能需要进
行优化。对于组合免疫荧光和α-Bungarotoxin 染
色，可以将α-Bungarotoxin 络合物与荧光标记的
第二抗体一起孵育。
1、在室温下，将新鲜冷冻的切片在 PBS 中
的 4%多聚jia醛中固定 15 分钟。或者可以将切
片在-200C 的冰冷甲醇中固定 5 分钟。用 PBS 冲
洗 3 次。
2、在室温下用 PBS/0.1% Triton X-100 渗透
切片 10 分钟。甲醇固定的切片不需要透化。
3、制备 PBS 中 1ug/ml 的α-Bungarotoxin 染
色溶液。络合物也可以在免疫荧光封闭缓冲液
中稀释。
4、用足够的染色溶液覆盖切片，以完全覆
盖组织。可以将 Parafilm 盖玻片放在染色溶液的
顶部，以将溶液均匀地铺在切片上。
5、在暗室内室温下孵育至少 15 分钟。
6、在 PBS 中冲洗几次。 7、安装在荧光防褪色介质和盖玻片中。
图 1、新鲜的大鼠骨骼肌冰冻切片，
用 Alexa 488-α-Bungarotoxin（绿色）
染色。 核用 DAPI 复染成蓝色。
