兔NO检测试剂盒

¥420
普利莱
北京
2022-09-06 12:22

北京普利莱(APPLYGEN)基因技术有限公司

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北京普利莱(APPLYGEN)基因技术有限公司
凌先生
产品属性
产品说明
NO检测试剂盒(Nitric Oxide Assay Kit E1030

适应物种:人、猴、猪、牛、羊、鸡、兔、小鼠、大鼠
货号产品名称规格价格(元)
E1030NO检测试剂盒(NitricOxideAssayKit500420

适应物种:人、猴、猪、牛、羊、鸡、兔、小鼠、大鼠
描述: (Nitric oxideNO)是一种重要的气体信号分子和效应分子,可以作为第二信使参与许多生物效应和生理病理过程。体内NO含量低,半衰期短,且易被氧化。Griess反应一直是最经典的生物样品NO测定方法,反应产物的光密度OD值与NO浓度呈线性关系。本试剂盒基于Griess 反应原理,采用优化的反应条件和比色法测量液体样品NO的浓度。方法简单,线性范围2.5~800µM。按照每150 µl反应体系含50 µl样品推算,相当于样品的检测灵敏度约为300 pmol/50 µl
特点:
1试剂盒基于最经典的Griess反应原理。操作方法简单方便,灵敏度高。
2线性范围2.5-800uM
3适用于血液、尿、培养基中的检测。
4发表的SCI文章超过50
规格:500
储存:4ºC避光保存6个月有效
准备步骤:
测定前取出试剂升温到室温。
标准品稀释:每次测量均新做标准曲线,用与样品相似的液体稀释标准品。
A. 100 mmol/L NaNO2标准品8µl,加到992µl蒸馏水中,得到1000µl800 µM管。
B. 800 µM管取200µl加入200µl蒸馏水得400µM管,然后依次取样用蒸馏水倍比稀释,得到200100502512.56.253.131.57 μM管。最后设置不加标准品的0浓度管。
C. 从以上各管各取50 µl 加入酶标板。
D. 等待后续加入样品,以及加入Griess试剂后,一起反应并测量。
样品测量:
1. 50 µl标准品或样品,加入96孔板中。
2. 每孔加入50 µl Griess R1
优化步骤:室温避光放置5分钟。此步骤可进一步提高灵敏度。但NO浓度较高时可省略。
3. 每孔加入50 µl Griess R2
4. 室温避光放置5分钟。
5. 540 nm (490-550 nm均可)测定吸光度。应在30 min内测完,以免退色降低灵敏度。
6. 制备标准曲线:以吸光度OD值为x轴,标准品浓度为y轴,用Excel做图并得到标准曲线公式。
7. 将样品OD值代入公式计算NO浓度。
说明:
1. 30 min内测完,以免退色而降低灵敏度。
2. 快速测定:如果样品NO浓度较高,则可将Griess R1R2预先1:1等体积混合后,各取100 µl混合试剂与50 µl样品反应测定。
3. 样品所赖以存在的液体的内在成分会干扰测定,降低OD值和灵敏度。干扰程度:尿液>血清>血浆>培养基>蒸馏水。
4. 每次测量必须新做标准曲线,尽量用与样品相同的液体稀释标准品。
5. 细胞培养基中酚红的红色颜色不影响测定。

以下为使用普利莱NO检测试剂盒发表的文章,供参考:
1Ji Y, Sun X, Liu X Y, et al. Toxoplasma gondii: effects of exogenous nitric oxide on egress of tachyzoites from infected macrophages[J]. Experimental parasitology, 2013, 133(1): 70-74.
2Hong Q, Qi K, Feng Z, et al. Hyperuricemia induces endothelial dysfunction via mitochondrial Na+/Ca 2+ exchanger-mediated mitochondrial calcium overload[J]. Cell calcium, 2012, 51(5): 402-410.
3Ding Y, Zhang Z F, Dai X Q, et al. Myricetin protects against cytokine-induced cell death in RIN-m5f β cells[J]. Journal of medicinal food, 2012, 15(8): 733-740.