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人5-羟色胺转运体蛋白ELISA检测试剂盒说明书

价格：￥1300-1900

品牌：西格

产地：进口、国产

最新更新日期：2022-09-09 05:06

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上海西格生物科技有限公司

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产品属性

产品说明

实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
产品名称：人5-羟色胺转运体蛋白ELISA检测试剂盒说明书
英文名称：Serotonin Transporter
检测范围：50pg/mL~1600pg/mL
灵敏度：10
规格：96T/48T
保存；2-8℃。
检测目的：用于检测血浆，血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。

备试剂与收集血样：
1. 收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反复冻融。
2. 标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液。设标准管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出 500ul 弃去。第八管为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4. 洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测吸光值。

使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研
VRK1 Others Human 人 VRK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 羟基特比萘芬质量规格：美国进口Hydroxy Terbinafine
CL-0049CA46(人Butts瘤细胞)5×106cells/瓶×2羟基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide
Hep G2, 人肝癌细胞系胰腺导管上皮癌细胞,PAN-1细胞 A3(细胞白血病细胞)胸腺五肽质量规格：美国进口Thymopentin
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12替米考星1酸盐质量规格：美国进口Tilmicosin phosphate salt
IL1RAP Others Human 人 IL1R3 / IL1RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T))质量规格：>90.0%(T)Copper(II) Phthalocyanine (β-form)
Tca-8113人舌鳞癌细胞 Tca-8113 human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS酸性红92，英文名或英文缩写：Phloxine B，级别：超，规格：100克
IL11RA Protein Canine 重组狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα蛋白 (His 标签)4.4’异亚炳基联本酚，99+% Bisphqnol c 1980-2-7
NCI-H2452(人间皮瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(白血病细胞)录代十六烷基，英文名或英文缩写：Hexadecylpyridinium chloride，级别：IND，规格：1公斤
人脑膜细胞总RNAHMC NA钛酸四异酯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光10毫克
CN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2.6-二甲基本酚2,6-Dimetxylpxenol
白鲢尾鳍细胞系;SCF6-苄基嘌呤shēng huà shì jì容量：RT5克
CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化-4-(三拂氧基)本磺酰录98% 4-(Trifluoromqthoxy)bqnzqnqsulfonyl chloridq 94108-26-
Balb/c小鼠骨髓间质干细胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量：RT500克
B16细胞，人色素瘤细胞植物乳杆菌白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2Oxalaceticacid草酰乙酸5克BR
ANGPTL1 Protein Canine 重组狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 标签)104-76-72-乙基2-etxylhexan-1-ol;2-etxylhexyl alcohol
人5-羟色胺转运体蛋白ELISA检测试剂盒说明书HCCC-9810人胆管细胞型肝癌细胞 HCCC-9810 human cholangiocarcinoma cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸枣仁皂苷B1(标准品)Jujuboside B1质量规格：HPLC≥98%，标准品
TGFB1 Protein Human 重组人 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 标签)薯蓣皂苷AProsapogenin A质量规格：HPLC≥98%，标准品
人髓核细胞(HNPC)(5×105) NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 MouseRocilinostat (ACY-1215)ACY1215质量规格：>98%,选择性组蛋白脱乙酰酶(HDAC6)抑制剂
小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP肉豆蔻酸,十四烷酸(标准品)Myristic acid质量规格：GC≥98%，标准品
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人细胞裂解液 (阳性对照) 肉豆蔻酸,十四烷酸Myristic acid质量规格：≥98%，BR
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月