蛋白免疫印迹western blotting

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2021-06-09 17:52

南京医药研发与技术服务行业协会

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南京医药研发与技术服务行业协会
叶小姐
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597286577
产品属性
服务名称蛋白免疫印迹western blotting
提供商南京医药研发与技术服务行业协会
产品说明

实验目的:检测组织或细胞中特定目的蛋白的含量。
实验原理:将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离,再转移到杂交膜(blot)上,然后
通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。其中的步骤包括蛋白样本提取制备,蛋白定量,电泳,转膜与显色。
实验材料:
试剂:蛋白(全/核/膜/胞浆)提取试剂盒、蛋白定量试剂盒、SDS凝胶电泳上样缓冲液、电泳缓冲
液、封闭液、一抗、二抗、ECL发光液、显影液、定影液。
仪器:匀浆器、紫外分光光度计、bio-rad电泳仪、恒温箱。
实验内容与方法:
1、 蛋白提取:根据需要测定的目的蛋白主要来源(胞浆、胞核或者全蛋白),区分组织提取或者
细胞提取,选取相应的试剂盒。
2、 蛋白定量:bradford法、BCA法或lowery法测定出所提取的蛋白含量。
3、 蛋白变性:5×电泳上样缓冲液,煮沸5-10分钟。
4、 凝胶电泳:垂直电泳分离出目的蛋白条带。
5、 转膜:将SDS丙烯酰胺中的蛋白通过水平电泳的方式转移到PVDF或者NC膜上。
6、 免疫反应:目的蛋白分别与相应的一抗、二抗结合。
7、 显色反应:通过化学发光法将蛋白条带显影至胶片上。
服务周期:(2到8周,根据样本数量而定)
结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数
据、图片,文本或电子版。
收费标准:
全蛋白提取 (全蛋白提取及蛋白定量结果,80元/样)
小鼠骨骼肌组织中myoglobin蛋白电泳条带
核蛋白提取 (核蛋白提取及蛋白定量结果,100元/样)
膜蛋白提取 (膜蛋白提取及蛋白定量结果,200元/样)
预实验 (客户提供一抗,800元/膜)
正式实验 (客户提供一抗,1000元/膜,每张膜最多8个样)