甲基化检测方法(BSP-直接测序法)

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2021-06-10 08:47

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产品属性
提供商广州誉嘉生物
服务名称BSP甲基化分析服务-亚硫酸氢盐测序法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)
规格/样
产品说明
甲基化检测方法(BSP-直接测序法)实验原理
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。针对要调查的区域设计BSP引物进行PCR扩增,对扩增产物进行测序就可以判断哪些CpG位点发生了甲基化;一般将PCR产物克隆后进行测序成功率会比较高。

服务的流程

1. BSP引物设计:针对感兴趣的基因区域进行BSP引物的设计
2. 亚硫酸氢盐处理基因组DNA:提取基因组DNA并进行亚硫酸氢盐的转化
3. PCR扩增目的片段:BSP引物扩增感兴趣的区域
4. 克隆到载体:将PCR产物纯化后连接到载体上
5. 克隆测序:挑取阳性菌斑,提取质粒并测序(10个克隆)
6. 序列分析:对测序的结果进行比对和甲基化分析

优势特色:

1. 特异性高,它能够提供特异性很高的分析结果,这是所有其他研究甲基化的分析方法所不能比拟的;
2. 灵敏度高,可以用于分析少于100个细胞的检测样品。用微量的基因组DNA进行分析就能得到各个DNA分子精确的甲基化位点分布图。

备注:
1、客户提供:要调查的基因名称、种属,要调查的甲基化区域或位点;
2、样品要求:细胞≥105个;组织≥100mg;全血≥0.5ml;基因组DNA ≥5ug;
所有样品建议干冰寄送,保持低温,保证样品质量。

擅长科室领域

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