人芳香胺N-乙酰化转移酶ELISA检测试剂盒说明书

¥1300 - 1900
西格
进口、国产
2021-06-10 08:50

上海西格生物科技有限公司

我要认领
上海西格生物科技有限公司
韩丽君
18930344717 021-57810052
2801747566@qq.com
产品属性
供应商上海西格
数量27
样本体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
标记物详见说明书
适应物种大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物
应用ELISA检测
检测方法详见说明书
检测限用于检测血浆,血清及相关液体等样本
规格48T/96T
产品说明
产品名称:人芳香胺N-乙酰化转移酶ELISA检测试剂盒说明书
英文名称:Serotonin N-acetyltransferase
检测范围:75pg/ml.~2400pg/ml.
灵敏度:10
规格:96T/48T 
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。




实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。

备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)

检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月




使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人颅骨造骨细胞RNAHCO miRNA5 μg亚精胺质量规格:>99%,进分Spermidine

HL-60细胞,白血病原髓细胞人非小细胞肺癌细胞,NCI-H23细胞 MSC, 小鼠雪旺细胞亚精胺1酸盐质量规格:>98%(T),进口原装Spermidine phosphate salt hexahydrate
豚鼠胚胎细胞;104C1白杨素(标准品)质量规格:HPLC>98%,分析标准品Chrysin
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人细胞裂解液 (阳性对照) 白杨素质量规格:>98%,BRChrysin
CL-0459U14(小鼠子细胞)5×106cells/瓶×2刺芒柄花素(标准品)质量规格:HPLC>98%,分析标准品Formononetin
A-204细胞,人横纹肌肉瘤细胞两歧双歧杆菌人肝永生化细胞;THLE-3N-去甲基罗格列酮质量规格:美国进口N-Desmethyl Rosiglitazone

U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤) 5×106cells/瓶×25-羟基罗格列酮β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口5-Hydroxy Rosiglitazone β-D-Glucuronide
HT-1080(人纤维肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形细胞株 EB病毒转化的人B细胞;KM9401磺胺嘧啶质量规格:美国进口Sulfadiazine
人永生化细胞;CNLMG-B5537LCN-乙酰基磺胺嘧啶质量规格:美国进口N-Acetyl Sulfadiazine
RK2 Others Mouse 小鼠 RK2 / kB 人细胞裂解液 (阳性对照) 5'-羟基苯卡维地洛质量规格:美国进口5'-Hydroxyphenyl Carvedilol
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株单核细胞型瘤细胞,THP 1细胞 FaDu(人咽鳞癌细胞)2-本并噻唑shēng huà shì jì容量:5

野生型人c-kit受体细胞株;A7d3-叔丁基-4-羌基茴香迷 3-tqrt-Butyl-4-xy7noxycnisolq 11-00-6
SERPINA7 Others Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-二基奈shēng huà shì jì容量:100
大鼠纤维母细胞;1/EJ 1-1metxylpalmitate软脂酸1002.5N99.5%
MERTK Others Human MERTK / Mer (aa 578-872) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照),3-二录1,3-Dichloropropane;Trimetxylene dichloride
人芳香胺N-乙酰化转移酶ELISA检测试剂盒说明书星形胶质细胞培养基AM溴蓝[pH指示剂]Bromochlorophenol Blue质量规格:pH指示剂

APCDD1 Others Human APCDD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙基橙[pH指示剂]Ethyl Orange质量规格:pH指示剂
B母细胞;HMy2.CIR4-乙氧基橘红盐酸盐(>95.0%(T))4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride质量规格:>95.0%(T)
正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F 转移胰腺腺癌细胞,AsPC-1细胞 McCoy细胞,小鼠成纤维细胞系DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7--2,1,3-苯并恶二唑DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]质量规格:用于蛋白质组分析,用于高效液相色谱标记,荧光染料,用于质谱的衍生化试剂
5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系 Human2,3-萘二醛(>99.0%(GC))2,3-Naphthalenedialdehyde质量规格:>99.0%(GC)
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研