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瞿麦探针法PCR鉴定试剂盒说明书

¥1200-3499
博湖
进口、国产
2022-09-15 04:26
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上海博湖生物科技有限公司

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上海博湖生物科技有限公司
韩丽君
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产品属性
产品说明
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称：瞿麦探针法PCR鉴定试剂盒说明书
英文名称：Herba dianthi
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶（2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
碱性品红(分析标准品) Basic Fuchsin 质量规格：分析标准品英文名称Human6-keto-prostaglandinelisakit人6-同-前列腺素(6-keto-prostaglandin)规格：96T/48T
百里香酚蓝 Bromothymol blue 质量规格：酸碱指示剂粪便副伤寒沙门氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR扩增检测试剂盒20
铋试剂Ⅱ(CP) Bismuthiol II 质量规格：CP ELISAKitTAA人肿瘤相关抗原规格：48T/96T
铋试剂Ⅱ(98%) Bismuthiol II 质量规格：0.98 小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒，英文名： TCC C5b-9 ELISA Kit
铍试剂Ⅱ Beryllon II 质量规格：AR 大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA检测试剂盒RatChorionicGonadoophin,CGELISAKit 96T/48T
邻苯三酚红 Bromopyrogallol red 质量规格：IND 人多功能蛋白聚糖(versican)试剂盒 human versican/PG-M/PG-350 ELISA kit
盐酸副品红 Basic Fuchsin 质量规格：BS,用于生物学染色 Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒规格：96T/48T
灿烂黄 Brilliant Yellow 质量规格：IND DNA标准样(100至2000碱基)50
刚果红(AR) Congo red 质量规格：AR Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA试剂盒小鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
钙羧酸指示剂(AR) Calconcarboxylic acid 质量规格：AR 小鼠末端补体复合体C5b-9(C5b-9)ELISA试剂盒，英文名： C5b-9 ELISA Kit
瞿麦探针法PCR鉴定试剂盒说明书卡铂-d4 Carboplatin-d4 质量规格：美国进口英文名称MouseTIMP-1ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)规格：96T/48T
N-氧基长春新碱 Vincristine N-Oxide 质量规格：美国进口英文名称MouseTissuefactorELISAKit小鼠组织因子(TF)规格：96T/48T
4-去乙酰基长春新碱甲代硫酸盐 4-Desacetyl Vincristine Methosulfate 质量规格：美国进口英文名称MouseTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)规格：96T/48T
N-去甲酰-4-去乙酰长春新碱 N-Desformyl-4-desacetyl Vincristine 质量规格：美国进口英文名称MouseTissuePolypeptideAigenELISAKit小鼠组织多肽抗原(TPA)规格：96T/48T
N-甲酰长春碱(长春新碱杂质G) N-Formyl Leurosine 质量规格：美国进口英文名称MousetotalhemolyticcomplemeELISAKit小鼠总溶血补体(CH50)规格：96T/48T
脱氢非洛地平 Dehydro Felodipine 质量规格：美国进口英文名称Mouset-PAELISAKit小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)规格：96T/48T
(R)-(+)-非洛地平 (R)-(+)-Felodipine 质量规格：美国进口英文名称MouseTpPELISAKit小鼠血栓前体蛋白(TpP)规格：96T/48T
(S)-(-)-非洛地平 (S)-(-)-Felodipine 质量规格：美国进口英文名称MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡELISAKIT小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsRⅡ)规格：96T/48T
8-羟基鸟嘌呤盐酸盐 8-hydroxy Guanine hydrochloride 质量规格：美国进口英文名称MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorIELISAKIT小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体I(TNFsRI)规格：96T/48T
烟酰胺鸟嘌呤二核苷酸钠盐 Nicotinamide guanine dinucleotide sodium salt 质量规格：美国进口英文名称MouseTumornecrosisfactorαELISAKIT小鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISAKIT规格：96T/48T
英文名称MouseThromboxaneB2小鼠血栓素(TXB2)规格：96T/48T 7α-硫代甲基螺内酯 7α-Thiomethyl Spironolactone 质量规格：美国进口
英文名称MouseTie-1小鼠Tie-1规格：96T/48T 7α-硫代螺内酯 7α-Thio Spironolactone 质量规格：美国进口
英文名称MouseTie-2小鼠Tie-2规格：96T/48T 6β-羟基-7α-(硫代甲基) 螺内酯 6β-Hydroxy-7α-(thiomethyl) Spironolactone 质量规格：美国进口
英文名称MouseTIMP-1大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)规格：96T/48T 卡铂-d4 Carboplatin-d4 质量规格：美国进口
英文名称MouseTissuefactor小鼠组织因子(TF)规格：96T/48T N-氧基长春新碱 Vincristine N-Oxide 质量规格：美国进口
英文名称MouseTissuefactorpathwayinhibitor小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)规格：96T/48T 4-去乙酰基长春新碱甲代硫酸盐 4-Desacetyl Vincristine Methosulfate 质量规格：美国进口
英文名称MouseTissuePolypeptideAigen小鼠组织多肽抗原(TPA)规格：96T/48T N-去甲酰-4-去乙酰长春新碱 N-Desformyl-4-desacetyl Vincristine 质量规格：美国进口
英文名称Mousetotalhemolyticcompleme小鼠总溶血补体(CH50)规格：96T/48T N-甲酰长春碱(长春新碱杂质G) N-Formyl Leurosine 质量规格：美国进口
英文名称Mouset-PA小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)规格：96T/48T 脱氢非洛地平 Dehydro Felodipine 质量规格：美国进口
英文名称MouseTpP小鼠血栓前体蛋白(TpP)规格：96T/48T (R)-(+)-非洛地平 (R)-(+)-Felodipine 质量规格：美国进口
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