BCA蛋白浓度测定试剂盒

¥280
biohao
2021-06-10 09:39

武汉百浩天生物科技有限公司

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武汉百浩天生物科技有限公司
江进
15308622976 027-89352536
bio@biohao.com
产品属性
数量大量
规格500T
产品说明
货 号:
P0130
名 称:
BCA蛋白浓度测定试剂盒
规 格:
500微孔
价 格:
280.00
CAS #:


BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明
试剂盒组成包装(500微孔)保存
BCA试剂100ml2-8℃
Cu试剂3ml2-8℃
PBS稀释液30ml2-8℃
BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA)1ml-20℃

本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔,如果是1ml比色皿时可做100孔。
产品简介
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
使用说明
一,微孔酶标仪法
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。
3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

二,分光光度计法、
如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下:
1.配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2, 稀释标准品:取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。
3, 取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。
离心管号1234567(样品管1)8(样品管2)9(样品管3)
标准蛋白BSA040ul80ul120ul160ul200ul200ul适当稀释的样品1200ul适当稀释的样品2……
PBS200ul160ul120ul80ul40ul0000
BCA工作液2ml2ml2ml2ml2ml2ml2ml2ml
4, 37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
P1002RIPA裂解液(强)100ml220
P1004RIPA裂解液(中)100ml220
P1006RIPA裂解液(弱)100ml220
P1008RIPA裂解液(强中弱套装)3*50ml280
P1010NP-40裂解液100ml220
P1012SDS裂解液100ml220
P1014细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒50T/200T420/980
P1016非变性细胞裂解缓冲液100ml220