| 数量 | 大量 |
| 规格 | 500T |
货 号: | P0130 |
名 称: | BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
规 格: | 500微孔 |
价 格: | 280.00 |
CAS #: |
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明
本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔,如果是1ml比色皿时可做100孔。 产品简介 碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 使用说明 一,微孔酶标仪法 1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。 2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。 3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 4. 各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。 二,分光光度计法、 如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下: 1.配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。 2, 稀释标准品:取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。 3, 取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。
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| P1002 | RIPA裂解液(强) | 100ml | 220 |
| P1004 | RIPA裂解液(中) | 100ml | 220 |
| P1006 | RIPA裂解液(弱) | 100ml | 220 |
| P1008 | RIPA裂解液(强中弱套装) | 3*50ml | 280 |
| P1010 | NP-40裂解液 | 100ml | 220 |
| P1012 | SDS裂解液 | 100ml | 220 |
| P1014 | 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 | 50T/200T | 420/980 |
| P1016 | 非变性细胞裂解缓冲液 | 100ml | 220 |