TUNEL细胞凋亡检测试剂盒,BR,.TUNEL Apoptosis Assay Kit

Ex/Em (nm) 556/579
Overview

Printer Friendly Version
Ex/Em (nm)556/579MWN/ACAS #N/ASolventN/AStorageF/D/LCategoryCell Analysis
Cell Cytotoxicity
RelatedApoptosis and Cytotoxicity
Cell Apoptosis
Biochemical Assays
DNA fragmentation represents a characteristic of late stage apoptosis. DNA fragmentation in apoptotic cells can be detected by terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL). The TUNEL assay relies on the presence of nicks in the DNA which can be identified by TdT, an enzyme that catalyzes the addition of dUTPs that are secondarily labeled with a marker. All the existing TUNEL assays contain the highly toxic sodium cacodylate which might induces apoptosis and also decrease DNA production and DNA strands. Our TUNEL Apoptosis Assay Kit uses proprietary buffer system free of sodium cacodylate. The kit is based on incorporation of a fluorescence dye TF3 modified deoxyuridine 5'-triphosphates (TF3-dUTP) at the 3' OH ends of the DNA fragments that form during apoptosis. The assay is optimized for the direct detection of apoptosis in either detached or attached cells without using antibody. The kit provides all the essential components with an optimized assay protocol. It is suitable for fluorescence microplate reader, fluorescence microscope, or flow cytometer. Its signal can be easily detected at Ex/Em = 550nm/590 nm.
Quick Preview
This protocol only provides a guideline, and should be modified according to your specific needs.
Note: Thaw Components C at room temperature, keep Components A and B on ice before use.
1. Culture cells to an optimal density for apoptosis induction according to your specific protocol. We recommend about 30,000 to 50,000 cells/well for adherent cells grown in a 96-well microplate culture, or about 1 to 2 x 106 cells/mL for non-adherent cells. At the same time, culture a non-induced negative control cell population at the same density as the induced population for every labeling condition. Here are a few examples for inducing apoptosis in suspension culture:
1) Treat Jurkat cells with 2 μg/ml camptothecin for 3 hours.
2) Treat Jurkat cells with 1 μM staurosporine for 3 hours.
3) Treat HL-60 cells with 4 μg/ml camptothecin for 4 hours.
4) Treat HL-60 cells with 1 μM staurosporine for 4 hours.
2. Fixation and Permeabilization
2.1 Remove cell media.
2.2 Add 100 μL/well/96-well plate of 4% formaldehyde fixative buffer (not supplied) to each well.
Note: For non-adherent cells, add desired amount (such as 2 x 106 cells/mL) of 4% formaldehyde fixative buffer.
2.3 Incubate plates for 20 to 30 minutes at room temperature.
2.4 Remove fixative.
Optional: add 100 μL/well/96-well plate of the permeabilization reagent (0.2% Triton X-100 in PBS, not supplied) after the fixation if needed, and incubate the plate for 10 minutes at room temperature.
2.5 Wash the cells with PBS 2-3 times.

Optional: You may also prepare a positive control for TUNEL reaction using DNAase I by digesting cells with DNAase I for 30 min at room temperature before proceed to TUNEL reaction (Step 3)

备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

超干溶剂，格式试剂，氘代试剂，色谱溶剂，医药中间体，分析对照品，生化试剂盒，染色液，现货10000+
色谱甲醇，超干乙醇，超干甲醇，氘代氯仿，氘代DMSO，四三苯基膦钯，钯碳催化剂
常规试剂 甘氨酸、TRIS、尿素、巯基乙醇、牛血清白蛋白Ⅴ，4%组织细胞固定液，TMB单组分显色液
BCA蛋白浓度测定试剂盒，淋巴细胞分离液，彩虹蛋白maker，30%Acr/Bis(29:1) ，胰蛋白酶-EDTA 消化液(0.25%)
葡聚糖凝胶、茉莉酸甲酯、特美汀、胶原酶（1-5型，青链霉素混合液(100×)，Percoll 细胞分离液
胶原蛋白1型，II型、纤维素、螯合树脂、玉米素、利福平，PBS缓冲液，TAE，TBE，RIAP裂解液
脱落酸、蓝色葡聚糖2000、tci DPPH、4万种试剂大量现货
胎牛血清四季青，1640培养基，DMEM培养基，MS培养基，琼脂粉
日本同仁 CCK8、潮霉素B 、K1622、蛋白酶K、异硫*酸胍
OXOID 0042胰蛋白胨、0021酵母粉
西班牙琼脂糖、樱花包埋剂、封口膜、柯达胶片、高压灭局指示胶带、透析袋规格全