人结肠平滑肌细胞【HumanColon:NormalColonicSmoothMuscleCells】
产品信息:
产品说明
人结肠平滑肌细胞【HumanColon:NormalColonicSmoothMuscleCells】
人结肠平滑肌细胞【HumanColon:NormalColonicSmoothMuscleCells】
产品描述:人结肠平滑肌细胞提取于人结肠组织,平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式,肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。公司提供的人结肠平滑肌原代细胞均来自新鲜组织,用于培养人结肠平滑肌原代细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人结肠平滑肌细胞培养试剂盒(HumanColonPrimaCell™:NormalColonicSmoothMuscleCellsCatNo.3-0120)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,人结肠平滑肌原代细胞可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
试剂及耗材
人结肠平滑肌细胞【HumanColon:NormalColonicSmoothMuscleCells】Transwell板:
孔径<3.0µm 细胞共培养 研究下室细胞B代谢物(分泌物)对上室细胞A的影响
孔径=5.0、8.0、12.0µm 细胞趋化 计数进入下室的细胞量,研究下室营养成分或趋化因子对上室细胞的影响
孔径=8.0、12.0µm 细胞迁移 计数进入下室的细胞量,研究上室细胞的迁移能力
孔径=8.0、12.0µm 细胞侵袭 计数进入下室的细胞量,研究上室细胞的侵袭能力
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤:
1、人结肠平滑肌细胞【HumanColon:NormalColonicSmoothMuscleCells】先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2、在空中加入约5×105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0,6,12,24小时取出,拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法:使用Image J软件打开图片后,随机划取6至8条水平线,计算细胞间距离的均值。
7、数据处理:每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离,求出均数和标准差,时间为横轴,迁移距离为纵轴(mm)作图,并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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