ABTS自由基清除能力测试试剂盒

（A005-96T 酶标板法）

一、测定原理

采用ABTS（2,2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt）评价样品抗氧化能力最初由Miller等（1993）提出，现采用的一般是后来Re等（1999）改进后的方法。该方法利用ABTS可被过硫酸钾、过氧化氢、二氧化锰等一系列化合物氧化，生成蓝绿色的ABTS+阳离子自由基，在734nm处有最大吸收峰。在抗氧化剂的作用下，ABTS+还原成无色的ABTS。通过测定734nm处的吸光值，即可判定反应物的抗氧化能力。

二、试剂组成

试剂一：ABTS试剂300μL × 1支

试剂二：液体试剂300μL × 1支

试剂三：1mM Trolox标准溶液1ml×1支（乙醇配制）

三、储存条件及有效期

试剂盒-20℃可保存6个月。

四、试剂的配制

ABTS应用液：将试剂二小心全部转入试剂一管内，旋好管盖，摇匀，室温放置12-16h，得到ABTS浓缩液。取10μLABTS浓缩液，采用稀释液（稀释液先采用纯水20×稀释）稀释至734nm处吸光度为0.65-0.75，记下稀释倍数（通常稀释倍数为50-200倍，可先从80-100倍区间内开始尝试。）将剩余浓缩液按稀释倍数稀释，得到ABTS应用液，避光存放。

Trolox标准溶液：如您需要将样品的ABTS自由基清除能力表示为Trolox当量（TEAC），则需要同步测定Trolox的ABTS清除能力；如您仅需要将结果表示为ABTS自由基清除率，则您可以忽略此步骤（可以不需要用到试剂三）。