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| 服务名称 | 蛋白纯化——实验服务 |
蛋 白 纯 化
在蛋白纯化部分，我们能够为您提供蛋白的粗纯化和精细纯化，以及蛋白的修饰和检测方面的各项服务。
包涵体的分离和变复性
包涵体（inclusion body），是致密的不溶性蛋白和RNA的凝聚体，包含大部分的表达蛋白。对包涵体进行分离和变复性，表达蛋白的得率往往较低，工艺比较复杂。因此该项服务需要提供成熟的复性工艺，否则无法保证蛋白得率和实验时间。
包涵体的分离和变复性 | |
实验内容 | 实验内容：按照提供的成熟复性工艺进行实验.包涵体的分离和变复性一般有以下两种途径: |
实验材料 | 需提供发酵菌体沉淀或包涵体. |
实验器材 | 高压连续流匀浆器(型号:AHBasic） |
实验时间 | 未知 |
实验说明 | 蛋白得率不能保证 |
蛋白的精细纯化
在对发酵产物进行简单处理和粗纯化后，对蛋白的精细纯化是拿到高纯度蛋白的重要步骤。
我们在该项服务里可以通过离子交换、透析超滤、凝胶过滤、亲和层析等方法对目的蛋白进行精细的分离纯化。由于纯化方法参数众多,过程复杂,因此对已知纯化工艺和未知纯化工艺的目的蛋白作区别安排:
蛋白的精细纯化 | |
实验内容 | a) 对于常用的，或者已经有成型的纯化工艺的目的蛋白，我们可以为您提供中试规模的生产。由于纯化工艺已固定，可以确定生产时间。 b) 工艺摸索：对于一些新的目的蛋白，需要您提供该蛋白具体的理化性质，如分子量，等电点，融合蛋白，蛋白酶酶切位点，二硫键，疏水性等等，我们可以为您尽快地摸索出最佳的纯化路线。生产时间不能固定。 |
实验材料 | 需提供蛋白粗纯化样品 |
实验器材 | AKTA纯化系统(型号:explorer100)、P-50泵、UV-1紫外检测仪和Record101记录仪；以及亲和（金属螯合、肝素、GST、Protein A等）、离子交换、疏水、凝胶过滤、反相等全套的色谱分离介质及适用于不同规模的层析填料和层析柱。 |
实验时间 | a) 可确定 ；b) 不可确定 |
实验说明 | 可以得到毫克级、克级单位的蛋白原液，纯度≥95，以及蛋白质检报告，N端测序报告等. |
蛋白印迹分析（Weatern-blot Analysis）
蛋白质印迹分析（Western Blot Analysis）：是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。
蛋白印迹分析（Weatern-blot Analysis） | |
实验内容 | 经过SDS-PAGE分离的蛋白样品，转移至硝酸纤维素薄膜上，分别与一抗，二抗（标记物为辣根过氧化物酶）反应，经过底物显色，检测特异性目的蛋白成分和含量。 |
实验材料 | 需提供细胞或者组织样品，或者提供已知浓度的蛋白样品，和所需的抗体 |
实验器材 | 紫外可见分光光度计（型号：UV2600），凝胶成像仪(型号：FlourChem FC2)，BioRad半干转膜系统（型号：Trans-Blot SD）. |
实验时间 | 5个工作日 |
实验说明 | 1—8个样品每张膜；提供曝光X胶片或NBT染色的NC膜或数码照片. |
蛋白（抗原，抗体）标记和偶联：
蛋白（抗原，抗体）标记和偶联是免疫学实验的重要手段，常用于酶联免疫测定、荧光免疫测定等检测抗原抗体反应的实验中。我们这里推出常用的蛋白标记和蛋白偶联实验服务。
蛋白（抗原，抗体）标记和偶联 | |
实验内容 | a)提供蛋白（抗原，抗体）类标记服务，可提供生物素标记，辣根酶 (HRP)标记，碱性磷酸酶标记，荧光素标记等； b)提供蛋白（抗原，抗体）,多肽类偶联服务，可进行KLH偶联,OVA偶联,BSA偶联等。 |
实验材料 | 需要提供10mg以上纯化蛋白质冻干粉或液体，蛋白纯度≥85，及蛋白的相关资料；标记物或偶联物可由客户提供。 |
实验时间 | 5--8个工作日 |
实验说明 | 得到相应的蛋白标记物或蛋白偶联物。 |
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