金属鏊合层析,又称固定化金属离子亲和层析(Immobilizedmetal ion affinity chromatography, IMAC)。该法利用蛋白质表面的某些氨基酸(如组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等)和金属离子(Cu2+、Zn2+、Ni2+等过渡金属离子)发生特殊的相互作用的原理来实现蛋白质的分离。
His标签蛋白纯化介质(Ni)是将金属离子Ni2+鏊合在琼脂糖凝胶上形成的一种亲和层析介质,具有吸附容量大、选择性好、易于再生、成本低等优点,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质及多肽的分离纯化,尤其是组氨酸标记蛋白质的高效纯化。
目前可提供IDA(亚氨基二乙酸)、NTA(次氨基三乙酸)和CM-ASP(羧甲基天冬氨酸)三种不同鏊合配体的His标签蛋白纯化介质,并可根据客户需求提供鏊合其它金属离子(Cu
2+、Co
2+、Zn
2+、Fe
3+等)的介质。此外,为了解决金属离子残留问题,还开发了未鏊合金属离子的空白胶,用于吸附去除产品中残留的金属离子。
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 4% or 6%交联琼脂糖凝胶 |
| 配基 | IDA or NTA |
| 形状 | 球形 |
| 填料平均粒径 | 90 μm (45-165) |
| 金属离子载量 | 15-120μmol Ni2+ /ml(可调) |
| 动态载量 | 40mg-50mg His-Pro/ml wet gel (IDA) 30mg-40mg His-Pro/ml wet gel (NTA) |
| 最高流速(25℃) | 500 cm/h |
| 最高耐压 | 0.3 MPa (3 bar) |
| pH稳定性 | 3~13(长时间);2~14(短时间) |
| 保存 | 4~8 ℃(20%乙醇) |