一抗稀释液

¥300 - 3500
博湖
进口、国产
2021-06-10 10:30

上海博湖生物科技有限公司

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上海博湖生物科技有限公司
韩丽君
18117197628 021-57763112
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产品属性
数量57
英文名Primary Antibody Dilution Buffer
CAS号详见说明书
保质期详见说明书
供应商上海博湖
保存条件详见说明书
规格
产品说明
产品名称:一抗稀释液
英文名称: Primary Antibody Dilution Buffer

储存条件: -20℃,有效期为2年;2-8℃,有效期半年
外观(性状): 液体
单位:
公司生产的一抗稀释液(PrimaryAntibodyDilutionBuffer)适用于免疫组织化学与免疫印迹等实验中一抗的稀释。产品添加了抗体保护剂、稳定剂等成分,有效增加了稀释后一抗的稳定性。用此稀释液稀释后的一抗可在2-8℃环境下稳定保存至少半年。
使用方法:
按照一抗推荐效价(或个人优化条件),将适量抗体加入抗体稀释液中即可。例如,效价为11000时,可将1ul抗体加入到1ml抗体稀释液中,充分混匀后即可使用。抗体最好现用现稀释,稀释后的抗体可2-8℃保存。
注意事项:
如需抗体回收再利用,建议在2-8℃进行抗体的结合反应,以减缓抗体效价的衰减速度。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品参数:
产品名称一抗稀释液
英文名称Primary Antibody Dilution Buffer
货号BH-DB1042
免疫球蛋白:

注意事项: 
 1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
 2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
 3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
 4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
 5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

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温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。