Cas12a检测系统用DNA荧光-淬灭双标记荧光探针

CRISPR_Cas核酸酶主要包括两类：一类是RNA引导下可以切割RNA链的Cas13a和Cas13b；另一类是RNA引导下可以切割DNA链的Cas12a和Cas14。Cas12a和Cas13都有一个共同特点，除了切割靶向DNA或RNA序列之外，还可以切割其他DNA或RNA序列，但是Cas13酶的这种附加切割能力比Cas12a要强。Cas12a的靶基因是ssDNA和dsDNA，并且Cas12a引导链需要识别PAM序列（Cas12a的PAM序列为TTTV）。

Cas12a酶的附加DNA酶切功能，可以切割特定单链DNA探针（荧光和淬灭标记），使用5'端带有荧光物质（如：FAM等)，3'端带有淬灭物质（如:BHQ1等）的双标记荧光探针进行荧光检测的方法。当探针完整时，5'端的荧光物质受到3'端的淬灭物质的制约，不能发出荧光。而当双标记荧光探针被分解后，5'端的荧光物质便会游离出来，发出荧光，实现核酸检测。RPA扩增的双链DNA，在crRNA的引导下Cas12a可以切割双链模板DNA和荧光标记探针，探针被水解后释放出荧光信号，通过检测荧光信号便可知道是否有DNA模板。

上海惠诚生物提供Cas12a检测系统用DNA荧光-淬灭双标记荧光探针。

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