| 服务名称 | 腺病毒载体构建与包装 |
| 提供商 | 柏礼生物医药 |
腺病毒载体构建与包装
腺病毒是一种没有包膜的颗粒,其中的DNA以线性双链的形式存在。由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺病毒载体已成为世界上最常用的基因治疗载体之一。
技术特点
病毒表达系统 | 腺病毒表达系统 | 慢病毒表达系统 |
病毒基因组 | 双链DNA病毒 | RNA逆转录病毒 |
自主复制 | 不能 | 不能 |
是否整合 | 病毒基因组游离于宿主基因组外,瞬时表达外源基因 | 病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因 |
感染细胞类型 | 感染绝大多数细胞,包括分裂期、非分裂期细胞。 | 感染绝大多数细胞,包括分裂期、非分裂期细胞。 |
表达丰度 | 高水平表达 | 中水平表达 |
表达时间 | 快(1-2 天) | 慢(2-4 天) |
滴度 | 滴度可达10E12pfu/mL | 滴度可达10E9-10E10TU/mL |
克隆容量 | 可插入高达8kb的外源片段,滴度随插入片段长度增加而降低 | 可插入不超过8kb的外源片段,滴度随插入片段长度增加而降低 |
免疫原性 | 高免疫原性 | 低免疫原性 |
RNAi | 病毒进入细胞往往引起细胞内干扰素反应,一般情况下不适合做RNAi实验 | 适合,是RNAi实验的优选工具 |
基因过表达 | 包装容量较大,可以满足较大基因的包装,是过表达基因的优选工具 | 包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响 |
过表达microRNA | 适合 | 适合,是过表达microRNA实验的优选工具 |
下调microRNA | 有报道但不成熟 | 有报道但不成熟 |
是否可以自行扩增 | 可以 | 需要特殊包装系统和包装环境 |
服务流程
1. 克隆目的基因或者合成针对目的基因的下调序列
2. 将目的基因片段构建进腺病毒穿梭载体
3. 穿梭载体与病毒骨架进行重组
4. 转染293A细胞进行病毒包装
5. 腺病毒大量扩增
6. 测定腺病毒滴度
提供产品
产品名称 | 病毒滴度 | 产品规格 | 赠送阴性对照病毒规格 |
非纯化腺病毒 | >10^10 PFU/ml | 1ml | 1ml (>10^10 PFU/ml) |
纯化腺病毒 | >10^11 PFU/ml | 1ml | 100ul (>10^11 PFU/ml) |