产品名称胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红价格规格: 100ml别名 胰酶英文名称 Trypsin-EDTAsolution,0.25%(withphenolred)储存条件 -20℃,有效期1年单位100ml/瓶20瓶/箱液体,2.5g猪胰蛋白酶和0.2gEDTA溶于1升PBS。不含钙和镁,含酚红。过滤除菌产品说明:在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。


1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
麦迪、麦白霉素检定培养基(普通轻质斜面培养基) 英文名称:Wheat albomycin Test Medium 产品规格:250g 卵黄琼脂培养基基础 Egg Yolk Agar Base 250g0.1mL×10 Rosetta (DE3) pLysS 感受态细胞 Rosetta (DE3) pLysS Competent Cell -80℃保存3000U 谷氨酸脱酶 GLDH -20℃保存大肠菌群快检纸片(水源水) Coliform bacteria detective plate 5份/包MUGal(4-甲基伞形-β-半乳萄糖苷)肉汤 用于多管发酵法快速检测大肠菌群 100g10000U T3 RNA聚合酶 T3 RNA Polymerase -20℃保存2 ug pBNID pBNID 低温运输,-20℃保存60g/L氯化钠蛋白胨肉汤 60g%/L NaCl Peptone Water 250g5mL dNTP溶液,10 mM dNTP Solution,10 mM -20℃保存25g 茜素红 S Alizarin Red S 室温保存改良Skirrow氏琼脂平板(9cm) Modified Skirrow Agar 10个/包丙二酸盐 20支葡萄球菌选择性琼脂110 英文名称:Staphylococcus Selective Agar No.110 产品规格:250g 1瓶 SF767细胞株 SF767 低温运输和保存2 ug pTRE3G-Luc pTRE3G-Luc 低温运输,-20℃保存10mL DNA上样液 (红色),6× DNAON 4℃保存胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红价格4-基伞形酮酰-beta-D-吡喃糖苷 MU-Gal 6160-78-7 质量规格:分子生物学级外消旋5-羧基去异丙基托特罗定 rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine 4601-13-5 质量规格:美国进口马来酸曲美布汀(标准品) Trimebutine maleate 34140-59-5 质量规格:含量测定灰黄霉素(标准品) Griseofulvin 126-07-8 质量规格:含量测定维生素D3 β-D-葡萄糖苷酸 Vitamin D3 β-D-Glucuronide 57918-08-8 质量规格:美国进口Artesunate 琥酯 88495-0 20mg8-去氧基-8-莫西沙星 8-Desmethoxy-8-fluoro Moxifloxacin 1513-15-9 质量规格:美国进口肉桂酸(标准品) trans-Cinnamic acid 140-10-3 质量规格:GC≥98%,标准品Hoechst 332染色液(1mg/ml) 1ml 支除草醚标准溶液(10μg/ml,u=5%) Nitrofen solution 16--5 质量规格:10μg/ml,u=5%孔雀绿 Malachite green 569-64-2 质量规格:IND grade2,4-二氨基-6-异丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T)) 2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine 24860-40-0 质量规格:>98.0%(T)Stevenleaf 绞股蓝皂苷(混合物) 72039-9 20mg层粘连蛋白(929-933) Laminin (929-933) 110590-64-2 质量规格:>95%,BR扑草净 Prometryn 7287-19-6 质量规格:>95%,BR7-羟基氨蝶呤 7-Hydroxy Methotrexate 5939-37-7 质量规格:美国进口
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