本试剂盒采用磷钨酸为沉淀剂,用于体外测定血清中高密度脂蛋白胆固醇含量。适用于手工、半自动生化分析仪。
背景资料: 高密度脂蛋白胆固醇可通俗地理解为"好"胆固醇,抗动脉粥样硬化的胆固醇,因为HDL-C可减少患冠状动脉心脏病的危险。主要是由肝脏合成。它是由载脂蛋白、磷脂、胆固醇和少量脂肪酸组成。
产品组成:| 组分 | 规格 |
| 试剂Ⅰ(RI)干粉 | 7瓶 |
| 试剂Ⅱ(RⅡ),pH7.0 | 70mL |
| 试剂Ⅲ(RⅢ) | 10mL×3 |
保存:2~10℃,避光
配工作液: 将一瓶RI加10mL RⅡ完全溶解(稳定10分钟使用,切不可剧烈振荡)配好后4℃保存。
注:工作液稳定10分钟后使用,工作液放室温(15~25℃)可以稳定8小时,4~8℃可以稳定7天。
使用方法:- 样本处理:
分级沉淀:取样200μL与RⅢ200μL混合(血清:RⅢ=1:1),室温(低于30℃)放置15分钟后3000转/分离心10分钟,取上清测定胆固醇测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用本公司的总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法,货号:SNM152)或者总蛋白定量测试盒(BCA法,货号:SNM078/SNM079)进行蛋白浓度的测定。
注:如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取,不需要测定蛋白,直接用匀浆液浓度进行计算。
- 操作表:(按上清液:工作液=1:100)
- 分光光度计(1mL比色杯)、半自动生化分析测定
| 成分 | 空白管 | 校准管 | 样本管 |
| 蒸馏水 | 10μL | | |
| 1.29mmol/L校准品 | | 10μL | |
| 上清液 | | | 10μL |
| 工作液(ml) | 1 | 1 | 1 |
混匀后37℃保温5分钟,500nm,蒸馏水或者空白管调零,测定各管吸光度值。
- 普通试管操作分光光度计比色(2mL比色杯)
| 成分 | 空白管 | 校准管 | 样本管 |
| 蒸馏水 | 20μL | | |
| 1.29mmol/L校准品 | | 20μL | |
| 上清液(ml) | | | 20μL |
| 工作液(ml) | 1 | 1 | 1 |
混匀后37℃保温5分钟,500nm,蒸馏水或者空白管调零,1cm光径比色。
- 96孔板操作,酶标仪比色
| 成分 | 空白孔 | 校准孔 | 样本孔 |
| 蒸馏水 | 3μL | | |
| 1.29mmol/L校准品 | | 3μL | |
| 上清液 | | | 3μL |
| 工作液 | 300 | 300 | 300 |
混匀后37℃保温5分钟,500nm处,酶标仪测定各孔吸光度值。
- 计算公式:
- 双蒸水调零:
HDL-C含量 (mmol/L) | = | 样本OD值-空白OD值 | × | 校准品浓度 (1.29mmol/L) | × | 样本前处理 稀释倍数(2×) |
| 校准品OD值-空白OD值 |
- 空白管调零:
HDL-C含量 (mmol/L) | = | 样本OD值 | × | 校准品浓度 (1.29mmol/L) | × | 样本前处理 稀释倍数(2×) |
| 校准品OD值 |
- 酶标仪比色:
HDL-C含量 (mmol/L) | = | 样本OD值-空白OD值 | × | 校准品浓度 (1.29mmol/L) | × | 样本前处理 稀释倍数(2×) |
| 校准品OD值-空白OD值 |