Klenow Fragment是DNA Polymerase I的截短酶。该酶在模板和引物存在的条件下，以dNTP作底物，沿5'-3'方向催化与模板互补DNA的合成，同时本酶还具有3'-5'外切核酸酶的活性。通过截短改造，使本酶失去了5'-3'外切核酸酶的活性。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶，是Pol A基因截短型表达产物。分子量大小约为68.2kDa。本制品浓度为5U/μl。

产品特点：
·缺失了5'-3'外切核酸酶的活性。
·酶比活性高，稳定性好，与其他酶兼容能力强。

适用范围：
1．在二代测序（NGS）应用中，主要用于文库构建过程中双链DNA片段的平端化处理。
2．寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
3．使用随机引物进行DNA标记。
4．双脱氧法DNA序列测定（Sanger法）。

单位定义：1单位活力定义为在37℃、30min内，将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。

质量控制：

性质	描述
蛋白纯度	＞99%
酶活性	5000U/mg
单链外切酶活性	50 U酶中，有活性
双链外切酶活性	50 U酶中，有活性
双链内切酶活性	50 U酶中，未检出
宿主基因组污染	50 U酶中，＜10个拷贝

产品组成：

组分	WH0161-1	WH0161-2
Klenow Fragment	500U	2500U
10×Buffer	500μl	1.5ml

储存条件：-25℃～-15℃保存。

贮存液成分：100mM磷酸钾盐缓冲液，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%甘油。

使用方法：
在NGS文库构建过程中，一般按终浓度0.01～0.1 U/μl的量加入Klenow，也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件：37℃，3h。
反应结束以后，后续一般会进行产物纯化操作。