磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)是一种能与生物大分子的碱性氨基酸结合的水溶性蛋白染料,其结合于细胞中的量的多少可以反映总蛋白量进而反映细胞数的多少。在515nm波长处的OD值与活细胞数呈良好的线性关系。
产品组成:| 组分 | 规格 |
| 固定液 | 50mL |
| 洗涤液A | 100mL |
| 染色液 | 25mL |
| 洗涤液B | 500mL |
| 溶解液 | 50mL |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
自备器材: 酶标仪(515nm)
注意事项: 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
染色液需避光保存,使用前需混匀,如染色液出现沉淀需过滤后使用;
使用洗涤液B清洗染色细胞需快速进行,以免染色漏出胞外。
操作方法:1.以96孔细胞培养板为例说明
2.从细胞培养箱内取出待测96孔细胞培养板,弃去上清;
3.小心加入固定液,每孔100μL,4℃孵育1小时;弃去固定液;
4.加入洗涤液A,每孔100μL,室温下静置30秒,弃去洗涤液A;重复步骤4;
5.加入染色液,每孔50μL,室温下避光孵育15分钟;弃去染色液;
6.加入洗涤液B,每孔100μL,弃去洗涤液B,此步骤需快速完成;
7.步骤6重复5~10次,直至把多余染料洗尽为止;
8.加入溶解液,每孔100μL,室温下避光孵育5分钟;
9.在波长515nm处,读取光吸收值。