一步法RT-qPCR试剂盒(荧光探针) 产品官方链接

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百奥莱博
北京
2026-02-04 10:53

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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北京百奥莱博科技有限公司
产品属性
货号JN0053
规格100次
产品说明

本试剂盒向PCR体系中添加了荧光探针(TaqMan或Molecular Beacon等),在扩增过程中,荧光量与扩增产物量成正比,因此可通过荧光量来测定样品核酸量。本制品以RNA为模板反转录合成cDNA第一链,然后再以合成的cDNA为模板,继续用基因特异性引物扩增,并用荧光探针进行检测。在同一反应体系中可完成从反转录到qPCR的全部过程。



本试剂盒采用的酶是HotStart Taq,并结合了特别的缓冲液体系,能有效抑制非特异性反应,在更广的范围内对核酸含量进行准确定量。



产品组成:
组分规格
2×BalbScript Probe One-Step qRT-PCR UltraMix1mL
BalbScript RT Enzyme Mix100μL
RNase-Free Water2×1mL
ROX Reference Dye I200μL
ROX Reference Dye II200μL

保存:-20℃

产品特点:
高特异性:采用特殊工艺制造的热启动HotStart Taq DNA聚合酶,大大提高了PCR扩增的特异性。
高效:百奥莱博精心配制的RealTime PCR专用试剂,具有更高扩增效率和灵敏度。

使用建议:
请将体系上下颠倒混匀,动作轻柔,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头及Microtube等,尽量避免污染。

参考染料:
● 用ROX Reference Dye I校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;Applied Biosystems StepOne/StepOne Plus;其他仪器。
● 用ROX Reference Dye II校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 7500/7500 Fast;Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P;其他仪器。
● 不需要用ROX Reference Dye校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/iQ/My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon/Chromo4;Eppendorf MasterCycler realplex/realplex 2s。Cepheid SmartCycler;Illumina Eco qPCR;R℃he Applied Science LightCycler 480;Thermo Scientific PikoReal Cycler;Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/Rotor-Gene 6000;其他仪器。


使用方法:
一、常用反应体系(20μL):
成分用量
2×BalbScript Probe One-Step qRT-PCR UltraMix10μL
BalbScriptR RT Enzyme Mix1μL
上游引物0.2~1.0μM(终浓度)
下游引物0.2~1.0μM(终浓度)
探针10μM0.4μL
模板1pg~1μg
RNase-Free Water至20μL


二、常用PCR循环:
A.两步法扩增程序(推荐):
温度时间循环数
42℃30min1
94℃5min1
95℃15s35~40
60℃1min

B.三步法PCR扩增程序(引物Tm值较低或其他原因):
温度时间循环数
42℃30min1
94℃5min1
95℃15s35~40
57℃20s
72℃30s