柱式植物基因组DNA提取试剂盒 产品官方链接

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百奥莱博
北京
2024-06-20 14:12

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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北京百奥莱博科技有限公司
产品属性
货号GS0070
规格50次|100次
产品说明

本试剂盒通过Buffer PCB裂解植物样品,释放出基因组DNA,然后采用特殊的吸附膜,能够有选择性地吸附核酸分子,去除其他杂质,得到高质量的基因组DNA。使用本试剂盒从100mg植物组织中可以获得3~10μg DNA,OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。抽提出的DNA可用于酶切、PCR、Southern blot等相关实验。



产品组成:
组分50次100次
Buffer PCB40mL80mL
Buffer BD30mL60mL
PW Solution18mL36mL
Wash Solution7.5mL15mL
TE Buffer (pH8.0)10mL20mL
吸附柱及收集管50套100套

保存:室温,4℃可保存时间更长。

注意事项:
Buffer PCB中含有刺激性化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。

准备工作:
1.自备材料:水浴锅、小型高速离心机(最大离心力≥ 12000×g)、1.5mL离心管、无水乙醇、异丙醇、RNase A溶液(10mg/mL)、β-巯基乙醇、氯仿等。
2.试剂盒初次开启,按瓶身标签说明在PW Solution中加入相应量的异丙醇混匀、Wash Solution中加入相应量的无水乙醇混匀,在瓶身做好标记。于室温密封保存(18mL PW Solution加入12mL异丙醇,7.5mL Wash Solution加入22.5mL无水乙醇;36mL PW Solution加入24mL异丙醇,15mL Wash Solution加入45mL无水乙醇)。
3.每次使用前请检查Buffer PCB是否出现沉淀,如有沉淀,请于65℃溶解后使用。
4.提前将水浴锅调至65℃备用。


提取步骤:
1.将50~100mg的新鲜植物组织在液氮中充分研磨成粉末,并转移至1.5mL的离心管中。
·研磨是否充分,将会影响基因组DNA的得率。磨碎标准是在加入Buffer PCB后,在溶液中没有大的组织团块。
·样品尽量不要采用植物的微管组织。
·对于含水量较多的样品,请尽量在研磨和裂解前挤干去除水分。
2.加入600μL 65℃预热的Buffer PCB和12μL β-巯基乙醇。震荡混匀,置于65℃水浴25min,间或混匀。
·如需得到无RNA的DNA,可在水浴后加入20μL的RNase A(10mg/mL),室温放置2~5min。
3.加入600μL的氯仿,充分混匀,12000rpm离心5min。吸取上层水相至一个干净的1.5mL的离心管中。
·含有多酚或多糖的植物组织,可以在进行第4步前用等体积酚:氯仿(1:1,pH8.0)反复混匀,12000rpm离心5min,取上清,反复抽提1~3次。
·不要吸取到中间层变性蛋白质部分。
4.加入与上层水相等体积Buffer BD,颠倒混匀3~5次,再加与上层水相等体积的无水乙醇,充分混匀后用移液器将其全部加入到吸附柱中,室温静置2min。10000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
5.将吸附柱放回收集管中,加入500μL PW Solution,10000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
·PW Solution使用前请检查溶液是否按比例加入异丙醇。
6.将吸附柱放回收集管中,加入500μL Wash Solution,10000rpm,离心1min,倒掉收集管中废液。
·Wash Solution使用前请检查溶液是否按比例加入无水乙醇。
7.将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心2min。
·此步绝不可省略,否则残留的乙醇会严重影响后续实验。
8.取出吸附柱,放入一个新的1.5mL离心管中,在吸附膜中央加入50μL TE Buffer,静置3min,12000rpm离心2min,得到的DNA溶液置于-20℃保存或直接用于后续试验。
·如果想提高DNA的得率,可重复步骤8或将TE Buffer 60℃预热。