本制品是是装填了MBPar Dextrin Agarose Resin 6FF的一种中压预装柱，规格1mL，预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA等，方便客户操作。
MBPar Dextrin Agarose Resin是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和层析介质，MBP可促进连接蛋白的正确折叠，增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBPar Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白，结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱，保护了目的蛋白的活性，MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。
MBPar Dextrin Agarose Resin 6FF以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质，具有更高的物理化学特性，可以耐受更高的压力，在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化，更适于工业大规模蛋白的纯化。
基本信息：| 基质 | 高度交联的6%琼脂糖微球 |
| 配体 | 糊精 |
| 粒径 | 45～165μm |
| 载量 | ＞10mg MBP蛋白(80kDa) |
| 最大压力 | 0.3 MPa,3 bar |
| pH稳定范围 | 3-12 |
| 储存缓冲液 | 20%乙醇 |
产品组成：| 组分 | 1mL | 5×1mL |
| MBP标签蛋白纯化柱(1mL) | 1mL | 5×1mL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：2～8℃，有效期2年。
注意事项：1．请勿冷冻保存本制品。
2．所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
准备试剂：● 所用水和Buffer在使用前最好用0.22μm或0.45μm滤膜过滤除菌。
● 结合/洗杂缓冲液：20mM Tris-HCl,200mM NaCl,1mM EDTA,pH7.4。
● 洗脱缓冲液：20mM Tris-HCl,1mM EDTA，10mM麦芽糖，pH7.4。
注：结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1mM DTT或10mM β-巯基乙醇。
使用方法： 注：样品在上样前最好用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。
1．
样品纯化(以Akta为例)a．准备：将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。
b．清洗：3～5倍柱体积去离子水冲洗层析柱中储存液。
c．平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
d．上样：将样品加到平衡好的层析柱中，推荐流速1mL/min，保证目的蛋白与树脂充分接触，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待检测。
注：样品的粘度增加使得即使上样体积很少，也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压，使得进样器更难使用。
e．洗杂：用10～15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，直到紫外吸收达到一个稳定的基线，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液，待检测。
f．洗脱：用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5倍柱体积洗脱液足够将目的蛋白洗脱下来。也可以用一个小的梯度，例如20倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。
g．清洗及保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。
2．
SDS-PAGE检测 将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。
3．
填料清洗 随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
a．3倍柱体积的去离子水；
b．3倍柱体积的0.1%SDS或0.5M NaOH溶液；
c．3倍柱体积去离子水；
d．3倍柱体积20%乙醇，保存于4℃。
| 问题 | 可能原因 | 推荐解决方案 |
| 柱子反压过高 | 填料被堵塞 | 清洗树脂。 |
| 裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上样前最好用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，或离心去除。 |
| 洗脱组分中无目的蛋白 | 目的蛋白未表达 | 优化实验方案，确保目的蛋白表达 |
| 样品或缓冲液中存在一些干扰因素如非离子去污剂 | 样品透析或用结合buffer稀释 |
| 细胞产生大量的淀粉酶影响结合力 | 培养基中添加葡萄糖，抑制淀粉酶的表达 |
| 融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲影响了目的蛋白的结合力 | 更换载体 |
| 柱子结合时间太短 | 将样品与树脂振荡孵育4℃ 2h或更长时间 |
| 洗脱样品较杂 | 目的蛋白降解 | 加一些蛋白酶抑制剂，如PMSF、EDTA等 |
| 平衡/洗杂不充分 | 增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂。 |
