本试剂盒提供了一种可靠、灵敏、安全和低成本的快速有效检测细胞活力与毒性的方法。本制品利用灵敏的易被氧化还原的物质通过在细胞生长的培养基中所产生的化学还原反应,将非荧光信号的染料转换成为红色荧光物质,从而检测细胞的存活率。该荧光信号可以用530nm的激发波激发,在590nm处可以获发射波。检测所产生的荧光信号是与样品中的活细胞数成正比的。根据不同类型的细胞,本试剂盒最低可以检测到至少40个细胞/孔,同时保证很好的重现性和灵敏度。
产品组成:| 组分 | 500T | 1000T |
| 细胞活力检测液 | 5mL | 10mL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
操作说明: 以下操作可用作通用指导建议。考虑不同细胞类型与培养条件的差异性,有必要根据实际情况优化您的操作步骤。
1.96孔细胞培养板每孔100μL培养基饲养细胞,控制细胞数目在40~10000个/贴壁细胞,2000~500000个/悬浮细胞。设置空培养基做对照。
2.加入10μL检测液至培养基中,37℃避光孵育5~6小时。
3.荧光微孔板读数530nm激发,590nm发射波读数。
结果计算: 对于细胞增殖或细胞毒性的检测,待测化合物的活性可计算为细胞数量的变化百分比,计算方法如下:
细胞活性(%) = 100 X (FCMPD - FO)/(FCTRL - FO) FCMPD和FCTRL分别是加入和未加入待测化合物时的平均荧光强度,FO是空白对照品的平均荧光强度。 对于剂量反应研究,可绘制检测数据与化合物浓度的曲线。也可采用PRISM或其他数据分析工具通过非线性回归分析确定EC
50(细胞增殖检测)和IC
50(细胞毒性检测)。