本试剂盒用于人血清中载脂蛋白B(ApoB)的定量检测。
检测原理: 血清中的ApoB与试剂中特异性的ApoB抗体结合,形成抗原抗体复合物而产生浊度,其浊度高低与血清中ApoB成正比。通过测定特定波长的吸光度值,参照标准曲线即可计算出血清中ApoB的含量。
背景资料: 载脂蛋白B存在于低密度脂蛋白的表面,细胞识别和摄取LDL主要通过识别载脂蛋白B实现。所以,载脂蛋白B增多时,即使LDL水平正常,也可使冠心病发病率增高。ApoB由肝脏合成,是低密度脂蛋白胆固醇(LDL-CHOL)的主要结构蛋白,约占LDL-CHOL总蛋白含量的97%,ApoB的测定可直接反映LDL-CHOL的水平。载脂蛋白B是各项血脂指标中较好的动脉粥样硬化标志物。
性能指标:| 测定的线性范围 | 0.4~2.5g/L(判定依据r2≥0.995) |
| 准确度 | 相对偏差≤15.0% |
| 精密度 | 批内CV≤5.5%;批间相对极差≤8.0% |
| 参考值范围 | 0.60~1.1g/L(此参考值仅供参考,建议各实验室建立自己的参考值范围) |
产品组成:| 组分 | 规格 | 成分 | 终浓度 |
| 试剂一 | 3×40mL | 磷酸盐缓冲液(pH7.0) | 0.1mol/L |
| 聚乙二醇(PEG) | 40g/L |
| Triton X-100 | 0.1mL/L |
| 试剂二 | 40mL | 抗ApoB血清 | 30% |
| 校准品 | 1瓶 | 粉剂 | - |
保存:在2~8℃,避光密封,有效期1年。
适用仪器: 分光光度计或各种类型的全自动生化分析仪和半自动生化分析仪。
样本要求: 空腹采血并尽快分离血清,避免溶血,溶血标本可能影响结果。
注意事项:1.仅供科研使用。
2.如仪器无本试剂盒所要求波长,可选择接近的波长。
3.样本与试剂比例可根据需要按比例调节。
4.不同批次的试剂不推荐混合使用。
5.当标本混浊或浓度过高超过标准曲线,需要用生理盐水稀释后测定,结果乘以稀释倍数。
使用方法:1.
主要性能参数| 主波长 | 340nm | 反应方法 | 两点终点法 |
| 辅助波长 | 700nm | 反应方向 | 向上 |
| 反应温度 | 37℃ | 校准类型 | 多点 |
2.
生化分析仪操作步骤| 成分 | 用量 |
| 样本/各浓度校准品 | 3μL |
| 试剂一 | 225μL |
| 混匀,置37℃孵育5分钟,读取各管吸光度A1 |
| 试剂二 | 75μL |
| 混匀,37℃孵育5分钟,读吸光度A2,计算△A=A2-A1 |
3.
分光光度计操作步骤| 成分 | 用量 |
| 样本/各浓度校准品 | 12μL |
| 试剂一 | 900μL |
| 混匀,置37℃孵育5分钟,双蒸水调零,0.5cm光径石英比色皿,读取各管吸光度值A1 |
| 试剂二 | 300μL |
| 混匀,置37℃孵育5分钟,双蒸水调零,0.5cm光径比色,读取各管吸光度值A2,△A=A2-A1 |
4.
校准程序 校准品加纯水600μL复溶,至少稳定30分钟后使用。校准品稀释方法:
| S1 | S2 | S3 | S4 | S5 |
| 校准品原液(μL) | 0 | 20 | 40 | 80 | 160 |
| 纯水(μL) | 160 | 140 | 120 | 80 | 0 |
5.
计算 多点定标,采用非线性法校正处理,以测定管△A可求得ApoB含量。