本产品特异性降解双链DNA,而不降解单链DNA。最常见的用途是用于清除RNA样品中的gDNA污染。
背景资料: 基因组DNA(gDNA)污染是RNA样品、蛋白样品或其他生物样品中普遍存在的现象。由于污染的gDNA也会作为后续RT-PCR中的PCR步骤的模板,因此会严重干扰后续RT-PCR的效率和准确性,尤其是定量RT-PCR。目前,去除RNA样本中gDNA污染最常用的方法是先用RNase-free DNase降解RNA样品中的gDNA,然后再灭活DNase。此方法分两步进行,因此操作不是非常便捷。为了克服上述方法的缺点,本公司开发出了本产品,
产品特点:1.一步完成,把本产品加入RNA样品中之后,不需要其他操作。
2.PCR级,可以使RNA样品中残留的gDNA污染(ng级)降低至少5个数量级,绝大多数都能降低到PCR检测不到的水平。去除效果比电泳级更好。
3.跟后续PCR和荧光定量PCR兼容,包括基于古细菌DNA聚合酶的PCR(如基于Pfu DNA聚合酶的PCR)。
4.本产品规格足够处理10个RNA样品,蛋白样品或其他样品,每个样品50μL。
5.本产品只用于科研。
产品组成:| 组分 | 规格 |
| DNA清除剂溶液A | 50μL |
| DNA清除剂溶液B | 50μL |
保存:-20℃,有效期一年。
使用方法:1.在离心管中按下表设置基因组DNA清除反应(50μL体系):
| 成分 | 用量 |
| 样品 | 50μL |
| DNA清除溶液A | 5μL |
| DNA清除溶液B | 5μL |
2.轻轻吹打混匀,短暂离心,37℃保温60分钟。如果需要灭活可以80℃保温10分钟。如果后续实验是PCR或RT-PCR,第一个循环的变性步骤就可以使其灭活,故可以省略灭活步骤。
3.所得反应液可以直接作为模板用于后续放-20℃待用。