淋巴细胞分离液1.077 产品官方链接

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2024-06-20 14:12

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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570202610
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产品属性
货号SY0532
规格100ml|5×100ml
产品说明
本制品每100mL包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸钠,20℃下密度是1.0770~1.0800g/mL。

背景资料:
淋巴细胞分离液(LSM)是一种滤膜除菌的即用型分离液,用于体外分离人外周血淋巴细胞,也可以从其他组织中分离淋巴细胞,包括脐带血和骨髓细胞等。

工作原理:

用去纤维蛋白或肝素处理人血,以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30min。离心过程中,由于差速迁移最终形成不同的细胞层。


红细胞和多形核粒细胞,它们通过梯度迁移至管底。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收,最后进一步清洗去除血小板,LSM和血浆。



产品组成:
组分100mL5×100mL
淋巴细胞分离液1.077100mL5×100mL
说明书1份1份

保存:室温,有效期2年。

注意事项:
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
2.稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体;
3.为保持淋巴细胞的活性,应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层,包括淋巴细胞和单核细胞。
4.本制品仅作科研用途!


操作方法:
用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人体血液;对于其他物种或者其他组织的血液,需要对此程序做出一定的改进
1.轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合。
2.无菌条件转移3mL LSM到15mL离心管中。
3.用2mL生理盐水混合2mL去纤维蛋白血液或肝素化血液。
4.小心将稀释血液加入含有3mL LSM(室温)的15mL离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。
5.室温下400×g离心15~30min,离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞,同时可以在LSM上形成一层单核淋巴细胞,如下图所示(分层情况从上到下依次为血浆层-单个核细胞层-LSM层-RBC颗粒)。
6.吸出淋巴细胞层上方2~3mm的血浆。
7.吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层,并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中,室温(18~25℃)离心10min,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围,例如160~260×g(清洗去除LSM,并降低血小板的百分比)。
8.再用平衡盐缓冲液清洗细胞,最后取适当的培养基(实验者所用)重悬细胞。
淋巴细胞分离液1.077