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北京
2024-06-20 14:12

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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北京百奥莱博科技有限公司
产品属性
货号SNM367
规格50ml|20ml|10ml
产品说明
本制品适用于骨髓细胞涂片及血液细胞涂片作染色检查,原始粒细胞呈阴性,早幼粒及以后各阶段细胞随细胞的成熟,阳性反应逐渐增强。嗜酸性和嗜碱性粒细胞亦为阳性。单核细胞为弱阳性反应,常为细小或弥散的阳性颗粒。淋巴细胞呈阴性反应,少数为弱阳性反应。巨核细胞及血小板为阳性。红细胞系列均属阴性。

试剂盒组成:
组分外观50mL包装
固定液无色透明液体50mL×2
试剂一R1粉剂白色粉末5支
R1稀释液无色透明液体50mL×1
试剂一应用液的配制:临用前将R1-粉剂倒入R1-稀释液中,摇匀(一支粉剂用10ml稀释液溶解)。
试剂二R2-A液红色液体2.5ml×5瓶
R2-B粉白色粉末5支
R2-B粉稀释液无色透明液体7.5ml×5瓶
试剂二应用液的配制:临用前将一支R2-B粉倒入一瓶R2-B粉稀释液中,摇匀,配成R2-B液。再将一瓶R2-A液与配好的R2-B液混合,摇匀,配制后静置20分钟后使用。
试剂三R3-复染液紫红色液体50ml×1瓶
赠送备用复活粉白色粉末5支
注:备用复活粉的作用是当试剂二应用液变成红色液体时,有可能试剂作用减弱,此时可加入备用复活粉一支,混匀,活力恢复。

保存:室温密封保存,有效期36个月,开瓶后有效期为12个月。试剂一应用液和试剂二应用液配好后若本次实验未用完,需-20℃冰箱冷冻避光保存。下次实验临用前,需平衡到室温再使用。

染色结果:
糖原呈紫红颗粒,上皮粘蛋白呈淡到深紫红色。粘蛋白及中性粘多糖呈深紫红色。糖蛋白呈淡红色。肥大细胞颗粒呈现红色。经过唾液或淀粉酶消化者则无糖元紫红颗粒。

小鼠肾脏组织糖原染色
图1:小鼠肾脏组织糖原染色

所需仪器:
光学显微镜、玻片、染缸、滴管、秒表、记号笔等。

使用说明:

一、样本处理
A.血涂片染色前处理
取新鲜全血或肝素抗凝全血进行涂片,自然晾干。用固定液对血片进行固定2~10分钟,水洗1分钟,自然晾干。B.骨髓涂片处理:
① 人的骨髓涂片同血涂片。
② 鼠骨髓涂片:取一段股骨或径骨,用带针头的注射器,向骨髓腔内推50μL的肝素-生理盐水,每片取3μL左右骨髓进行涂片。
③ 鸡的骨髓可直接剪开骨头刮出骨髓,其它操作均同血涂片。C.石蜡切片
① 脱蜡:二甲苯中脱蜡5-10分钟。再换用新鲜的二甲苯,脱蜡5-10分钟。
② 梯度入水:95%、70%、30%乙醇各2分钟,蒸馏水2分钟。


二、染色
A.血涂片、骨髓涂片
1.将配好的试剂一应用染液滴加在玻片的样本上,使其全部覆盖样本,将此玻片轻轻平放于染色架上,室温避光孵育10分钟。(气温高,可适当缩短时间,反之,延长时间)2.取出染色玻片,自来水流水缓慢冲洗玻片3~5分钟。3.玻片未完全干透前,滴加试剂二应用液于玻片样本上,用洗耳球将染液吹匀并全部覆盖样本,然后置于室温孵育10~15分钟。(气温高,可适当缩短时间,反之,延长时间)4.孵育结束后,取出染色玻片,自来水流水缓慢冲洗玻片30~60秒,自然晾干。5.滴加试剂三复染液染色20~30秒,然后流水冲净,待干后高倍镜镜检。建议用封固剂封片后,油镜下观察。
B.组织石蜡切片
1.将配好的试剂一应用染液滴加在玻片的样本上,使其全部覆盖样本,将此玻片轻轻平放于染色架上,室温避光孵育8~15分钟。(气温高,可适当缩短时间,反之,延长时间)2.取出染色玻片,自来水流水缓慢冲洗玻片3~5分钟。3.玻片未完全干透前,滴加试剂二应用液于玻片样本上,用洗耳球将染液吹匀并全部覆盖样本,然后置于室温孵育8~15分钟。(气温高,可适当缩短时间,反之,延长时间)4.孵育结束后,取出染色玻片,自来水流水缓慢冲洗玻片30~60秒,自然晾干。5.滴加试剂三复染液染色20~30秒,然后流水冲净,待干后高倍镜镜检。建议用封固剂封片后,油镜下观察。


三、染色结果分析
A.细胞染色结果
阳性结果为胞质内出现红色颗粒、块状或呈弥漫状红色。
(-)胞质无色,无颗粒。
(+)胞质淡红色或有少量红色颗粒,通常<10个颗粒。
(++)胞质红色或有10个以上红色颗粒。
(+++)胞质呈暗红色或有粗大红色颗粒,可出现红色块状。
(++++)胞质呈紫红色或有粗大红色块状。B.组织染色结果
组织中糖原及其它PAS反应阳性物质呈红色,中性粘多糖呈红色,中性粘液和硫酸化粘液呈紫色细胞核呈蓝紫色。