本试剂盒可测动物血清（浆）、组织及培养细胞、细胞培养上清等样本β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的活力。
背景资料：β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（简称NAG）广泛存在于各种组织器官、体液、红细胞、白细胞及血小板中，是溶酶体中的一种酸性水解酶。底物在NAG作用下水解，释放出游离的对硝基酚。加入碱性溶液停止反应，并使对硝基酚显色。在400nm处测吸光度，可计算酶活力单位。
NAG为溶酶体中一种重要的酶，可作为肾损伤一个极为灵敏的指标，由休克引起急生肾功能衰竭的机体尿液中极度增高，最高可达正常情况下的1200倍。急性肾小球肾炎、肾病综合症，毒物或药物引起的肾毒性反应均可使NAG增加。肾移植后，NAG的测定可用来判断有无排斥反应。
产品特点：1．操作简便：全程约20分钟，可测50例左右样本。
2．稳定性好：试剂盒2～8℃至少存放6个月。
3．再现性好：批内CV=4.6%，批间CV=7.19%。
4．回收试验：X =98%。
5．受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
6．测试面广：可测动物血清(浆)、组织、尿液以及各种水产等，效果均佳。
产品组成：| 组分 | 规格 |
| 试剂一：溶液 | 40mL |
| 试剂二：底物粉剂 | 1支 |
| 试剂三：终止剂 | 2×60mL |
| 试剂四：液体 | 6mL |
| 试剂五：3mmol/L对硝基酚标准贮备液 | 2mL |
保存：2～8℃，有效期6个月。
自备器材：1．分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为400nm）
2．恒温水浴箱或气浴箱（孵育温度为37℃）
3．漩涡混匀器
4．微量移液器
试剂配制： 0.6mmol/L对硝基酚标准应用液的配制： 3mmol/L对硝基酚标准贮备液作5倍稀释，即3mmol/L对硝基酚∶双蒸水=1∶4稀释。
底物缓冲液的配制： 底物溶解度小，配制底物溶液时，应先用适量试剂一将试剂二粉剂1支调成糊状，再边搅拌边逐渐加试剂一到30mL，混匀至完全溶解（不可加热）。配好后的底物缓冲液为过饱和溶液，如有结晶，可静置或离心后取上清进行检测。用不完的底物缓冲液4℃可保存两个月以上。
注意事项：1．试剂四天冷会有结晶析出，测试前置于37℃水浴直至透亮。
2．用分光光度计测定时吸光度至0.6或酶活力至60单位呈线性，超出此范围请将样本用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数即可。
3．尿酶浓度随尿流率而变动，因此尿酶测定要求留取24小时尿；但因留24小时尿不方便，也不准确，故用“每单位/肌酐”比值计算酶排出率，效果较好。
操作步骤：1．按下表加入各成分配置反应体系。
| 成分 | 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
| 双蒸水 | 100μL | | | |
| 0.6mmol/L标准应用液 | | 100μL | | |
| 样品 | | | 100μL | 100μL |
| 试剂一 | 500μL | 500μL | | |
| 底物缓冲液 | | | 500μL | |
2．混匀，37℃准确反应15分钟。
3．按下表继续加入相应成分。
| 成分 | 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
| 试剂三 | 2mL | 2mL | 2mL | 2mL |
| 底物缓冲液 | | | | 500μL |
| 试剂四 | 50μL | 50μL | 50μL | 50μL |
4．混匀，在400nm处，1cm光径，双蒸水调零测各管吸光度值A。
1．单位定义：每升样品与底物在37℃作用1分钟，水解产生1μmol对硝基酚为1个酶活力单位。
2．计算公式：
NAG活力
(U/L) | ＝ | A测定－A对照 | ×C标准÷T×1000 |
| A标准－A空白 |
C
标准：标准液浓度，0.6mmol/L；
T：反应时间，15分钟。
3．计算举例：
取血清0.1mL按步骤操作检测，测得空白管吸光度为为0.003，标准管为0.436，对照管为0.148，测定管为0.432，则计算如下：
NAG活力
(U/L) | ＝ | 0.432－0.148 | ×0.6÷15×1000＝26.236U/L |
| 0.436－0.003 |
1．样本前处理
准确称取样本的重量，按重量(g):体积(mL)＝1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，制成10%匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清再用生理盐水稀释成1%的匀浆液待测。
注：该匀浆浓度仅为参考，客户测定时可以根据这一浓度自行摸索样本的实际所需浓度。
2．操作表
| 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
| 双蒸水 | 20μL | | | |
| 3mmol/L标准液 | | 20μL | | |
| 样品 | | | 20μL | 20μL |
| 试剂一 | 500μL | 500μL | | |
| 底物缓冲液 | | | 500μL | |
| 混匀，37℃准确反应15分钟。 |
| 试剂三 | 2mL | 2mL | 2mL | 2mL |
| 底物缓冲液 | | | | 500μL |
| 试剂四 | 50μL | 50μL | 50μL | 50μL |
| 混匀，在400nm处，1cm光径，双蒸水调零测各管吸光度值A。 |
3．单位定义：每克组织蛋白与底物在37℃作用1分钟，水解产生1μmol对硝基酚为1个酶活力单位。
4．计算公式：
组织NAG活力
(U/gprot) | ＝ | A测定－A对照 | ×C标准× | 1000 | ÷Cpr |
| A标准－A空白 | T |
C
标准：标准液浓度，3mmol/L
T：反应时间，15分钟。
Cpr：组织匀浆蛋白浓度，单位gprot/L(prot指的是蛋白)
5．计算举例：
取1%大鼠肾脏皮质匀浆20μL按操作表进行检测，测得各管吸光度如下：空白管为0.003，标准管为0.392，对照管为0.065，测定管为0.519，用考马斯亮蓝法测得1%匀浆蛋白含量为1.241g/L，则计算如下：
组织NAG活力
(U/gprot) | ＝ | 0.519－0.065 | ×3× | 1000 | ÷1.241＝188.09U/gprot |
| 0.392－0.003 | 15 |
